[发明专利]一组用于水禽细小病毒可视化鉴别诊断的荧光定量引物有效
| 申请号: | 201410134004.9 | 申请日: | 2014-04-04 |
| 公开(公告)号: | CN103882153A | 公开(公告)日: | 2014-06-25 |
| 发明(设计)人: | 万春和;黄瑜;陈红梅;施少华;傅秋玲;傅光华;程龙飞 | 申请(专利权)人: | 福建省农业科学院畜牧兽医研究所 |
| 主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡学俊 |
| 地址: | 350013 *** | 国省代码: | 福建;35 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一组 用于 水禽 细小 病毒 可视化 鉴别 诊断 荧光 定量 引物 | ||
1.一组用于水禽细小病毒可视化鉴别诊断的荧光定量引物,其特征在于:所述PCR引物P1和P2的序列为:上游引物P1:5’- TTCTTTGCTGCTCTGTTGGAAATA -3’,下游引物P2:5’- GCTTTTACCAATATGCC -3’。
2.一种如权利要求1所述的一组用于水禽细小病毒可视化鉴别诊断的荧光定量引物的检测方法,其特征在于:通过所述引物建立基于SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,根据利用该引物扩增的鹅细小病毒和番鸭细小病毒特异基因片段区域核苷酸GC含量的差异导致溶解曲线温度的差异,根据溶解曲线Tm值的差异可直接对鹅细小病毒和番鸭细小病毒感染进行检测。
3.根据权利要求2所述的一种如权利要求1所述的一组用于水禽细小病毒可视化鉴别诊断的荧光定量引物的检测方法,其特征在于:具体包括以下步骤:
(1)提取鹅细小病毒和番鸭细小病毒基因组DNA;
(2)用所述实时荧光定量引物P1和P2同时对鹅细小病毒和番鸭细小病毒进行基于SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测,反应完成后作出溶解曲线;
(3)实时荧光定量PCR反应结束后,根据溶解曲线特异性峰值Tm值的差异直接对鹅细小病毒和番鸭细小病毒感染情况进行可视化检测。
4.一种如权利要求1所述的一组用于水禽细小病毒可视化鉴别诊断的荧光定量引物在检测鹅细小病毒和番鸭细小病毒感染情况方面的应用。
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