[发明专利]一种岩藻聚糖硫酸酯及其制备方法和在制备抗流感病毒药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于海洋药物领域，涉及一种从褐藻的笼目海带(Kjellmaniella crassifolia)、糖海带（Laminaria saccharina）或海蕴(Nemacystus decipiens)中提取的岩藻聚糖硫酸酯及其制备方法和在制备抗甲型流感病毒药物中的应用。

背景技术

甲型流感病毒(Influenza A Virus,IAV)属正粘菌科(Orthomyxoviridae)具有包膜的负链RNA病毒，能引起急性呼吸道传染病，具有传染性强、致病力高等特点，严重危害人类健康。由于甲型流感病毒表面血凝素蛋白(HA)和神经氨酸酶蛋白(NA)的结构和抗原性不同，可分为不同亚型，如H1N1、H3N2和H5N1等。自2009年4月发源于墨西哥的甲型H1N1流感病毒爆发以来，相继爆发了H3N2、H5N1、H7N9和H10N8等不同亚型的流感病毒，全球每年有大量的人口被感染，造成了大量人口死亡和经济损失。

目前，应用于抗流感的药物主要有针对跨膜蛋白的离子通道阻断剂和作用于神经氨酸酶的抑制剂。其中，上世纪60年代开始应用的金刚烷胺及其衍生物金刚乙胺成为离子通道阻断类药物的代表，其靶点为流感病毒基质蛋白M2，通过阻断或者是防止通道打开等方式抑制流感病毒复制。而神经氨酸酶是病毒侵染细胞必须的酶，以此为靶点开发了扎那米韦(Zanamivir)和奥司他韦(Oseltamivir)两种抗流感病毒药物。但是，随着金刚烷胺和奥司他韦耐药性IAV病毒株的出现，尤其是离子通道阻断剂类药物容易产生抗药性、对消化器官和中枢神经的副作用等问题，寻找安全低毒、无耐药性抗病毒药物显得尤为迫切。

来源于海洋的硫酸多糖化合物成为本世纪生化药物开发的热点之一。岩藻聚糖硫酸酯是一类来源于海藻或海洋动物的酸性多糖，由于来源不同，其结构差异很大，但分子中一般均含有α-1,3或α-1,4或者α-1,3/1,4-连接-L-岩藻聚糖硫酸酯，具有免疫调节、抗病毒等活性。在岩藻聚糖硫酸酯提取分离和制备方面的文献和专利较多，如：中国专利申请（公开号CN101993501A）和中国专利申请（公开号CN102936293A）公开了胶体磨处理微波或超声波辅助提取岩藻聚糖硫酸酯的方法，中国专利申请（公开号CN101962415A）公开了自由基降解超滤膜分离纯化制备低分子量岩藻聚糖硫酸酯的方法，中国专利申请（公开号CN1560086）公开了一种高硫酸化岩藻聚糖的制备方法，这些方法步骤复杂、设备要求高，或者提取率低、生产成本高，同时不同程度对多糖结构造成破坏，产物结构不稳定和成分复杂。另外，中国专利申请（专利号CN200910013017.X、专利号CN200510047582.X、公开号CN1560086）公开了酶解提取制备岩藻聚糖硫酸酯的方法，但是酶解法制备反应条件苛刻，生产成本高而不利于推广。

海洋多糖特别是海洋酸性多糖的抗病毒活性也备受关注。中国专利申请（公开号CN102488697A、公告号CN102743409B和公开号CN102516323A）分别公开了寡聚甘露糖醛酸、聚甘露糖醛酸丙酯硫酸盐和低分子量卡拉胶寡糖在制备抗甲型H1N1流感病毒药物中的应用。国内外近期研究表明，来源于海蕴的岩藻聚糖硫酸酯具有很好的抗登革热病毒活性(Hidari et al.,Biochem.Biophys.Res.Commun.,2008,376(1):91-95)、来源于裙带菜的岩藻聚糖硫酸酯具有很好的抗甲型流感病毒和单纯胞疹病毒的活性(Hayashi et al.,Microbes.Infect.,2013,15(4):302-309;Hayashi et al.,Int Immunopharmacol.,2008,8(1):109-116)。国内外专利已经报道了一些关于岩藻聚糖硫酸酯在制备及其应用方面的专利(公开号CN103288978A)，但是来源于褐藻的笼目海带(Kjellmaniella crassifolia)、糖海带（Laminaria saccharina）或海蕴(Nemacystus decipiens)的岩藻聚糖硫酸酯的制备及其在抗甲型H1N1、H5N1和H3N2流感病毒方面的研究和应用还未见相关报道。

发明内容