[发明专利]地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌制剂及制备

权利要求书

1.一种地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌制备的益生菌制剂，其特征在于，采用地衣芽孢杆菌BL-09、枯草芽孢杆菌HM-66和植物乳杆菌HM-10混合分阶段固态发酵，发酵结束后经流化床干燥制备；

所述地衣芽孢杆菌BL-09保藏编号为CGMCCNo.5686；

所述枯草芽孢杆菌HM-66保藏编号为CGMCCNo.6733；

所述植物乳杆菌HM-10保藏编号为CGMCCNo.6741。

2.根据权利要求1所述地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌制备的益生菌制剂，所述混合分阶段固态发酵包括地衣芽孢杆菌BL-09、枯草芽孢杆菌HM-66和植物乳杆菌HM-10的种子培养及其固态发酵培养，其特征在于，

所述种子培养基质量百分比组成为：蛋白胨1%，葡萄糖2%，加水至100%，pH7.0-7.2；

所述固态发酵培养基质量比例组成为：豆粕：麸皮：玉米粉=10:9-10:0.5-1，水份含量控制在60-70%。

3.根据权利要求1所述地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌制备的益生菌制剂，所述地衣芽孢杆菌BL-09、枯草芽孢杆菌HM-66种子培养条件，放置于摇床上，转速为150r/min，温度为37℃，培养24h；植物乳杆菌HM-10种子培养条件，37℃静置培养24h。

4.根据权利要求1所述地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌制备的益生菌制剂，所述固态发酵培养方法为：固态发酵培养基上首先接种地衣芽孢杆菌BL-09和枯草芽孢杆菌HM-66种子液，接种量相同，各为3.0-5.0%（v/w），控制发酵温度30-37℃,湿度70-80%，混菌培养12-24h，再添加植物乳杆菌HM-10种子液，接种量为1.0-3.0%（v/w），其他条件不变，再发酵12-24h，共计发酵总时间为24-48h。

5.根据权利要求1所述地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌制备的益生菌制剂，由以下方法制备：

①菌种培养

地衣芽孢杆菌BL-09、枯草芽孢杆菌HM-66种子培养条件，放置于摇床上，转速为150r/min，温度为37℃，培养24h；植物乳杆菌HM-10种子培养条件，37℃静置培养24h；

②固态发酵

固态发酵培养基上首先接种地衣芽孢杆菌BL-09和枯草芽孢杆菌HM-66种子液，接种量各为3.0%(v/w)，培养温度37±1℃，湿度75%，发酵12h后，接种1.0%(v/w)植物乳杆菌HM-10混菌发酵36h；

③干燥

发酵结束经流化床干燥获得干燥的培养物。

6.根据权利要求1-5任一所述地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌制备益生菌制剂的方法，其特征在于，采用地衣芽孢杆菌BL-09、枯草芽孢杆菌HM-66和植物乳杆菌HM-10混合分阶段固态发酵，发酵结束后经流化床干燥；

所述地衣芽孢杆菌BL-09保藏编号为CGMCCNo.5686；

所述枯草芽孢杆菌HM-66保藏编号为CGMCCNo.6733；

所述植物乳杆菌HM-10保藏编号为CGMCCNo.6741。

7.根据权利要求6所述益生菌制剂的制备方法，混合分阶段固态发酵包括地衣芽孢杆菌BL-09、枯草芽孢杆菌HM-66和植物乳杆菌HM-10的种子培养及其固态发酵培养，其特征在于，

所述种子培养基质量百分比组成为：蛋白胨1%，葡萄糖2%，加水至100%，pH7.0-7.2；

所述固态发酵培养基质量比例组成为：豆粕、麸皮、玉米粉=10:9-10:0.5-1，水份含量控制在60-70%。

8.根据权利要求6所述益生菌制剂的制备方法，所述地衣芽孢杆菌BL-09、枯草芽孢杆菌HM-66种子培养条件，放置于摇床上，转速为150r/min，温度为37℃，培养24h；植物乳杆菌HM-10种子培养条件，37℃静置培养24h；

所述固态发酵培养方法为：固态发酵培养基上首先接种地衣芽孢杆菌BL-09和枯草芽孢杆菌HM-66种子液，接种量相同，各为3.0-5.0%（v/w），控制发酵温度30-37℃,湿度70-80%，混菌培养12-24h，再添加植物乳杆菌HM-10种子液，接种量为1.0-3.0%（v/w），其他条件不变，再发酵12-24h，共计发酵总时间为24-48h。