[发明专利]一种脱细胞胎盘基质材料的制备方法有效
申请号: | 201410120995.5 | 申请日: | 2014-03-27 |
公开(公告)号: | CN103861151A | 公开(公告)日: | 2014-06-18 |
发明(设计)人: | 徐世兰;侯鹏;刘凯 | 申请(专利权)人: | 成都青山利康药业有限公司 |
主分类号: | A61L27/36 | 分类号: | A61L27/36 |
代理公司: | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人: | 李高峡;张娟 |
地址: | 610000 四川省*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 细胞 胎盘 基质 材料 制备 方法 | ||
1.一种脱细胞胎盘基质材料的制备方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)取新鲜胎盘组织,清洗,加水,匀浆,离心,弃上清,得下层组织;
(2)取步骤(1)得到的下层组织,在甲醇和三氯甲烷的混合溶液浸泡2~6h,离心,弃上清,清洗,得下层组织;所述混合溶液中,甲醇和三氯甲烷的体积比为(0.5~1.5):(0.5~1.5);
(3)将步骤(2)得到的下层组织,在过氧乙酸和乙醇的混合溶液中浸泡2~6h,离心,弃上清,清洗,得下层组织;所述混合溶液中,过氧乙酸的浓度为0.1~0.3%(v/v),乙醇的浓度为3~7%(v/v);
(4)将步骤(3)得到的下层组织,震荡浸泡于浓度为0.3~0.7%(w/v)的十二烷基硫酸钠溶液中,浸泡4~10次,每次30~120min,震荡的频率为50~200r/min,离心,弃上清,清洗,得下层组织;
(5)真空冷冻干燥,灭菌,即可。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,水的加入量为胎盘组织体积的1~3倍;所述匀浆的时间是10~30min。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,水的加入量为胎盘组织体积的2倍;所述匀浆的时间是20min。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤(2)中,所述浸泡的时间为4h;所述混合溶液中,甲醇和三氯甲烷的体积比为1:1。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤(3)中,所述浸泡的时间为4h;所述混合溶液中,过氧乙酸的浓度为0.18%(v/v),乙醇的浓度为5%(v/v)。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤(4)中,所述十二烷基硫酸钠溶液的浓度为0.5%(w/v);所述浸泡的次数为10次,每次60min;所述震荡的频率为100r/min。
7.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤(1)、(2)、(3)和/或(4)中,所述离心的离心力为2000~4000g,离心时间为4~8min。
8.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于:所述离心力为3000g,离心时间为6min。
9.权利要求1~8任意一项所述方法制备的脱细胞胎盘基质材料。
10.权利要求9所述的胎盘基质材料在制备组织修复材料中的用途。
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