[发明专利]一种脆性X综合症临床快速PCR检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及一种脆性X综合症临床快速PCR检测试剂盒,属于生物工程技术领域。

背景技术

脆性X综合症是一种发病率仅次于唐氏综合症的遗传性智力低下综合症，呈X连锁遗传，占X连锁智力低下的40%。其外显率因男女性别不同有明显差异，男性80%，女性30%。脆性X综合症的发病率也因男女性别不同有差异，男性为1/4000，女性为1/6000.

95%以上的脆性X综合症患者发病的分子遗传学基础是FMR1基因上的CGG重复区结构扩展的突变引起的，5%以下则是由于FMR1基因的错义突变和缺失型突变影响FMR1基因的正常结构所导致的。

FMR1基因位于染色体Xq27.3，含17个外显子，全长38kb。在基因5’非翻译区存在一段数目可变的（CGG）n，在其上游250bp处存在一个CpG岛。（CGG）_n片段序列重复引起CpG岛的甲基化，使FMR1基因的转录受到抑制。正常人群FMR-1基因（CGG）_n重复次数在1-50之间。当重复数扩展到50-200时，携带者表型正常或有部分表现，但在遗传过程中会进一步扩展，通常被称为FMR-1基因的前突变。当重复数扩展达200及以上时，个体表现患病特征，这种FMR-1基因的突变称全突变。前突变CpG岛无异常甲基化，全突变常伴随有CpG岛异常甲基化，使FMR-1基因表达翻译产物受到抑制，从而造成临床症状。

脆性X综合症发病率高，临床表现复杂，目前尚无有效地诊断方法。降低脆性X综合症发病率关键是查出携带者以及患者。通过遗传咨询，产前诊断阻止患儿的出生。女性前突变携带者表型不明显，易被忽视，导致发病率逐代递增。因此开发一种进行X染色体FMR-1基因（CGG）n片段的检测的方法是非常有必要的。本发明旨在开发一种适用于临床检测的脆性X染色体综合症快速检测试剂盒。

目前已公开的检测方法如利用甲基化PCR、MLPA、Southern Blot、Real Time PCR等方法虽然都对脆性X综合征进行检测，但因其耗时长，消费高，步骤繁琐等缺点限制了其应用范围，而本发明很好的弥补了这些缺点，并在已有技术的基础上进行了创新，使脆性X综合症的检测方法更为完善。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足之处，提供一种脆性X综合症临床快速PCR检测试剂盒。

本发明的用于检测脆性X综合症的PCR检测试剂盒，所述的PCR试剂盒包括DNA聚合酶、dNTPs、引物群和缓冲体系，

所述的引物群包括用于扩增FMR-1基因CGG重复区的上游引物F和下游引物R，以及用于扩增内参片段的上游引物F和下游引物M，所述的引物群的序列为下列（1）-（6）组中的任意一组，引物序列信息见表1：

表1：引物序列信息