[发明专利]一种脆性X综合症临床快速PCR检测试剂盒

权利要求书

1.用于检测脆性X综合症的PCR试剂盒，其特征在于，所述的PCR试剂盒包括DNA聚合酶、dNTPs、引物群、缓冲体系及检测用标准Marker;

    所述的引物群包括用于扩增FMR-1基因CGG重复区的上游引物F和下游引物R，以及用于扩增内参片段的上游引物F和下游引物M，所述的引物群的序列为下列（1）-（6）组中的任意一组，引物序列信息见表1：

（1）目的基因引物的上游引物F的核苷酸序列为SEQ ID NO:1，下游引物R的核苷酸序列为SEQ ID NO:2，内参引物的上游引物F的核苷酸序列为SEQ ID NO:1，下游引物M的核苷酸序列为SEQ ID NO:3；

（2）目的基因引物的上游引物F的核苷酸序列为SEQ ID NO:4，下游引物R的核苷酸序列为SEQ ID NO:5，内参引物的上游引物F的核苷酸序列为SEQ ID NO:4，下游引物M的核苷酸序列为SEQ ID NO:6；

（3）目的基因引物的上游引物F的核苷酸序列为SEQ ID NO:7，下游引物R的核苷酸序列为SEQ ID NO:8，内参引物的上游引物F的核苷酸序列为SEQ ID NO:7，下游引物M的核苷酸序列为SEQ ID NO:9；

（4）目的基因引物的上游引物F的核苷酸序列为SEQ ID NO:10，下游引物R的核苷酸序列为SEQ ID NO:11，内参引物的上游引物F的核苷酸序列为SEQ ID NO:10，下游引物M的核苷酸序列为SEQ ID NO:12；

（5）目的基因引物的上游引物F的核苷酸序列为SEQ ID NO:13，下游引物R的核苷酸序列为SEQ ID NO:14，内参引物的上游引物F的核苷酸序列为SEQ ID NO:13，下游引物M的核苷酸序列为SEQ ID NO:15；

（6）目的基因引物的上游引物F的核苷酸序列为SEQ ID NO:16，下游引物R的核苷酸序列为SEQ ID NO:17，内参引物的上游引物F的核苷酸序列为SEQ ID NO:16，下游引物M的核苷酸序列为SEQ ID NO:18； 

根据权利要求1所述的用于检测脆性X综合症的PCR检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中还含有PCR增强剂，所述的PCR增强剂包含7-deaza-dGTP、甜菜碱或甜菜碱类似物、DMSO、甘油、甲酰胺和聚乙二醇中的2种或2种以上的组合。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，还提供一种特异性区分脆X综合征检测用Marker，其组成为4个不同大小的DNA片段：1)170-230 bp; 2)420-480 bp; 3) 600-640 bp; 4)1020-1080 bp ，浓度为50 ng-100 ng/μl。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，扩增过程产生2条特征条带，其中一条为内参片段大小为：100-300 bp；一条为目标片段，其大小为400-1200bp。

4.当目标片段大小处于为400-650 bp时，样品为阴性样本；当目标片段大小处于650 bp-1100 bp之间为阳性样本（前突变）；当目标片段大于1100 bp或无法扩增时，样本为阳性（全突变）。

5.如权利要求所述的PCR检测试剂盒具有用于临床快速检测脆X染色体的综合征的用途。