[发明专利]一种氧化损伤体外检测方法及检测试剂盒有效
| 申请号: | 201410118249.2 | 申请日: | 2014-03-27 |
| 公开(公告)号: | CN103901029A | 公开(公告)日: | 2014-07-02 |
| 发明(设计)人: | 吴志刚;周涛 | 申请(专利权)人: | 华中科技大学 |
| 主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78 |
| 代理公司: | 华中科技大学专利中心 42201 | 代理人: | 廖盈春 |
| 地址: | 430074 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 氧化 损伤 体外 检测 方法 试剂盒 | ||
1.一种氧化损伤检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)采集尿样作为检验样品;
(2)向检验样品中加入pH值在3至5之间的磷酸盐缓冲溶液,混合均匀,使得溶液pH值在3.7至3.9之间或4.5至5之间;
(3)向步骤(2)中的混合液,加入品红显色剂,混合均匀后使得品红在最终混合液中浓度在0.04g/L至1.4g/L之间,静置3~5min,根据溶液颜色深浅或348nm吸光值,按照溶液颜色越深或吸光值越大氧化损伤程度越高的原则,确定其氧化损伤程度。
2.如权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述步骤(2)中磷酸盐缓冲溶液的浓度为4mol/L至6mol/L。
3.如权利要求1所述的检验方法,其特征在于,所述步骤(3)品红显色剂,pH值在1.0至4.0之间,每升包括碱性品红0.5g至15g和亚硫酸盐0.03mol至0.35mol。
4.如权利要求3所述的检验方法,其特征在于,所述步骤(3)显色剂,其制备步骤包括:
(a)每称取0.1g-3g碱性品红试剂溶于200ml水,形成碱性品红溶液;
(b)向碱性品红溶液中加入亚硫酸盐0.006mol至0.07mol,溶解后用强酸调节pH值在1.0至4.0。
(c)向步骤(b)得到的溶液中,按照质量比例0.5%至30%逐渐加纯净活化的活性炭,同时间断震荡至溶液无色,过滤。
5.如权利要求4所述的检验方法,其特征在于,所述步骤(3)显色剂的制备方法步骤(b)中的强酸为浓硫酸、浓硝酸和/或浓盐酸。
6.如权利要求1所述的检验方法,其特征在于,所述步骤(3)当溶液颜色在无色至微黄之间时,确定氧化损伤程度为无损伤,溶液颜色在微黄至浅红之间时,确定氧化损伤程度为轻度损伤,溶液颜色在浅红至红色之间时,确定氧化损伤程度为中度损伤,溶液颜色在红色至深红之间时,确定氧化损伤程度为重度损伤,溶液颜色在深红至紫色之间时,确定氧化损伤程度为极重损伤。
7.如权利要求1所述的检验方法,其特征在于,所述步骤(3)当溶液348nm处吸光值在0-0.2之间时,确定氧化损伤程度为无损伤,当溶液348nm处吸光值在0.2-0.4之间时,确定氧化损伤程度为轻度损伤,当溶液348nm处吸光值在0.4-0.6之间时,确定氧化损伤程度为中度损伤,当溶液348nm处吸光值在0.6-0.8之间时,确定氧化损伤程度为重度损伤,当溶液348nm处吸光值在0.8-1.0之间时,确定氧化损伤程度为极重损伤。
8.一种氧化损伤检测试剂盒,其特征在于,包括缓冲剂、显色剂和比色卡;所述缓冲剂为pH值在3.0至5.0之间,浓度在4mol/L至6mol/L的磷酸盐缓冲液;所述显色剂为无色的碱性品红溶液,所述品红溶液包括,0.5g/L至15g/L的碱性品红,0.03mol/L至0.35mol/L的亚硫酸盐,pH值在1.0至4.0之间;所述比色卡包括5种颜色分别对应无损伤、轻度损伤、中度损伤、重度损伤和极重损伤。
9.如权利要求8所述的试剂盒,其特征在于,所述缓冲剂和显色剂的体积比为1:0.1-2。
10.如权利要求8所述的试剂盒,其特征在于,所述比色卡对应无损伤的颜色为无色至微黄,对应轻度损伤的颜色为微黄至浅红,对应中度损伤的颜色为浅红至红色,对应重度损伤的颜色为红色至深红,对应极重损伤的颜色为深红至紫色。
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