[发明专利]SCO6974基因缺失天蓝色链霉菌及其在提高抗生素产量的应用有效
| 申请号： | 201410116480.8 | 申请日： | 2014-03-26 |
| 公开（公告）号： | CN103881951A | 公开（公告）日： | 2014-06-25 |
| 发明（设计）人： | 刘钢;李淑贤;俞灵军 | 申请（专利权）人： | 中国科学院微生物研究所 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N15/76;C12N15/11;C12P17/16;C12P21/04;C12R1/465 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅 |
| 地址： | 100101 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | sco6974 基因 缺失 天蓝色 霉菌 及其 提高 抗生素 产量 应用 | ||
1.一种构建重组菌的方法，包括如下步骤：敲除天蓝色链霉菌基因组中的SCO6974基因，得到重组菌；
所述SCO6974基因的核苷酸序列为序列表中的序列1。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述敲除天蓝色链霉菌基因组中的SCO6974基因通过同源重组的方法实现。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述同源重组的方法包括如下步骤：
1）将含有预敲除SCO6974基因的片段导入含有SCO6974基因cosmid的出发菌中，得到中间菌，提取所述中间菌的质粒，得到SCO6974基因缺失的cosmid；
2）将SCO6974基因缺失的cosmid接合转移到天蓝色链霉菌中，得到SCO6974基因缺失的重组菌。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：
所述出发菌按照包括如下步骤的方法制备：将含有SCO6974基因的cosmid导入大肠杆菌E.coli BW25113/pIJ790中，得到出发菌；
所述SCO6974基因缺失的cosmid通过E.coli ET12567(pUZ8002)接合转移到天蓝色链霉菌中。
5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于：
所述含有预敲除SCO6974基因的片段的核苷酸序列为序列表中的序列3；
所述天蓝色链霉菌为天蓝色链霉菌M145。
6.由权利要求1-5所述方法制备的重组菌。
7.失活SCO6974基因的物质或权利要求6所述的重组菌在提高抗生素产量中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述失活SCO6974基因的物质为含有预敲除SCO6974基因的片段，所述片段的核苷酸序列为序列表中的序列3；
所述抗生素具体为放线紫红素和/或钙依赖抗生素。
9.SCO6974基因在调控抗生素产量中的应用，所述SCO6974基因的核苷酸序列为序列表中的序列1；所述抗生素具体为放线紫红素和/或钙依赖抗生素。
10.一种DNA片段，其核苷酸序列为序列表中的序列3。
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