[发明专利]1-羟基-1,2,3-苯并三嗪-4(3H)-酮在多肽合成中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及氨基酸多肽技术领域，具体涉及1-羟基-1,2,3-苯并三嗪-4(3H)-酮在多肽合成中的应用。 

背景技术

蛋白质是构成生物机体最基本的物质之一，它在细胞的发育、生长、代谢等过程中发挥着十分重要的作用。相对于蛋白质，更小的多肽在生物体中的作用也是不可忽视的。肽影响着生物体内许多重要的生理生化功能，它们作为神经递质、神经调节因子和激素，参与受体介导的信号传导。已知有100多种活性肽在中枢和外周神经系统、心血管系统、免疫系统和肠中起作用。此外，多肽类和基于多肽的药物也一直是药物学家们的研究热点。由2-14个氨基酸构成或分子量段在1500以下的小肽，它在所有的肽中价值最高，具有极强的生物活性和多样性，具有重要的生物学功能，可全面发挥人体生理功能，增强人体生理活性，是重要的生理调节物([德]N. 休厄德, H. D. 贾库布克著；刘克良，何军林等译.《肽：化学与生物学》北京科学出版社，2005)。然而，从天然来源中分离肽很困难，首先，通常每毫克鲜组织中肽的浓度为10^-15-10^-12mo1，因此只有高度灵敏的测量方法才可以检测出其在细胞内的位置；其次，用分离方法获取活性肽一般受其固有弱点的制约，如人体组织来源的限制等；再次，收集和储存器官时的复杂程序，如用于生产胰岛素的猪胰脏或牛胰脏的收集和存储，更增加了利用天然来源的难度。此外，如果用于分离活性肽和蛋白质的组织受到了致病病毒的感染，则会对健康造成巨大的危险。因此，多肽或多肽类药物的合成是必须首先解决的问题。 

多肽合成的方法分为酶促法和化学法。作为形成肽键的一种方法，酶促合成有其独特的优点。由于酶的专一性，对氨基酸的侧链官能团无需保护，酶促合成是立体专一性的，不会发生消旋的现象，酶促合成还具有可以在水溶液中进行的优点。但是，酶促法还不太成熟，尚未达到一般应用的程度，仍需进一步的研究。目前在多肽化学法合成中，主要采用羧基活化法来完成接肽反应，最早使用的是将氨基酸活化为酰氯、叠氮、对称酸酐以及混合酸酐的方法，但是由于这些条件下，存在氨基酸消旋、反应试剂危险和制备复杂等缺点，逐渐被后来的缩合试剂法取代。 

多肽缩合剂按照其结构可分为二亚胺型、磷正离子型和脲正离子型。N,N'-二环己基碳二亚胺(DCC)是于1955年开发出来的第一个碳二亚胺型缩合剂(J. Am. Chem. Soc., 1955, 77: 1067.)；至今,DCC仍是多肽合成中最常用的缩合剂之一。但反应生成的N,N'-二环己基脲(DCU)在大多数有机溶剂中溶解度很小，有时会混在产物中而很难除尽。将碳二亚胺固载在高聚物上所得的缩合剂使反应的后处理更为简单，例如，树脂固载的EDC(P-EDC)。1966年，E. Wiinsch和F. Dress发现在DCC缩合反应中，加入羟基琥珀酰亚胺(HOSu)（Chem. Ber. 1966, 99: 110.），大大提高了多肽产率，抑制了消旋和重排反应。因此，在此基础上，人们进一步尝试并发展了一系列N-羟基衍生物，其中1-羟基苯骈三氮唑(HOBt)和3-羟基-1,2,3-苯并三嗪-4(3H)-酮(HOOBt)较常用，HOOBt因其成本低廉和副产物少，成为理想的多肽缩合剂。 

发明内容

本发明的目的是提供了一种1-羟基-1,2,3-苯并三嗪-4(3H)-酮在多肽合成中的应用。 

本发明的技术方案为：1-羟基-1,2,3-苯并三嗪-4(3H)-酮在多肽合成中的应用，其特征在于主要通过以下方式实现：氨基酸甲酯盐酸盐和苄氧羰基保护氨基酸在有机溶剂和有机酸的条件下，通过多肽缩合剂1-羟基-1,2,3-苯并三嗪-4(3H)-酮（1-HOOBt）和催化剂1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)催化缩合制得多肽，所述的有机溶剂为四氢呋喃、二甲基甲酰胺、甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、叔丁醇、乙酸乙酯或石油醚，优选为二甲基甲酰胺，所述的有机酸为三氟乙酸，所述的多肽缩合剂1-羟基-1,2,3-苯并三嗪-4(3H)-酮的结构式为                                                   。 

本发明所述的1-羟基-1,2,3-苯并三嗪-4(3H)-酮在多肽合成中的应用，其特征在于：多肽合成中的反应温度为-20-50℃。