[发明专利]一种水产品中丙酸盐、柠檬酸盐和多聚磷酸盐同时测定的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及多种抑菌性添加剂的检测方法，特别涉及一种水产品中丙酸盐、柠檬酸盐和多聚磷酸盐同时测定的检测方法。

背景技术

丙酸及丙酸盐、柠檬酸盐和多聚磷酸盐是水产品保存和加工中常用的添加剂，均具有一定的抑菌作用。丙酸及丙酸盐是我国近年来发展起来的一种新型食品防腐剂，具抗菌作用，比山梨酸弱，比乙酸强，可有效抑制食品中霉菌、好气性芽孢杆菌、革兰阴性菌等的生长繁殖，也可以抑制黄曲霉毒素的产生。丙酸及丙酸盐是国家批准使用的人工合成防腐剂，但是其添加必须在规定范围内按规定限量使用，而且添加之后必须在食品标签上注明。因此对丙酸的快速准确检测方法的研究十分必要。目前，测定丙酸的检测方法主要有气相色谱法、高效液相色谱法和离子色谱法。我国现有的标准中采用气相色谱法、高效液相色谱法，但需用到大量有机试剂，丙酸不稳定，通常采用加入酸后蒸馏提取，前处理繁琐。离子色谱法可采用直接浸泡体取，且所使用试剂对实验人员的健康危害小，灵敏度高，但是由于甲酸本身的性质，检测回收率不是很理想。

磷酸盐可分为正磷酸盐和缩聚磷酸盐，目前,在水产加工中,多聚磷酸盐主要是指焦磷酸盐、三聚磷酸盐、三偏磷酸盐。多聚磷酸盐是一类性能优异的保水剂和抗冻剂，被许多水产企业大量用于海产品特别是冷冻海产品的加工和保存过程中，用来提高海产品的有效持水能力，并有效延长海产品的货架期，减少解冻后的流滴损失。同时，有研究证明多聚磷酸盐对水产品中的微生物生长有抑制作用。近些年来，有一些不法商贩利用了多聚磷酸盐可以加大水产品吸水性、抑制微生物生长等特点，在商品中人为注水，以次充好，以少充多。但是，人体如过多地摄入磷酸盐，则会降低钙吸收导致肌体钙磷失衡，继而引发疾病,因此各国对水产品中多聚磷酸盐含量作了明确的限量要求。针对这种情况，许多不法经营者采用各种措施，用不含磷酸盐成分的添加剂代替多聚磷酸盐，向水产品中人为注水，在提高利润的同时损害消费者利益，柠檬酸盐即是这种无磷添加剂的主要成分，由于其具有较强的广谱抗菌作用和稳定性，与保湿剂等合用，可用于延缓水产品的腐败，并能保持肉的持水性.但是柠檬酸的使用范围是受到严格限制的，因此水产品中柠檬酸的定性与定量分析对食品营养的研究意义重大，而且在食品生产过程的质量管理中也必不可少。

我国输欧水产品曾多次被欧盟通报多聚磷酸盐超标问题，且其5g/kg的限量要求针对焦磷酸盐、三聚磷酸盐和三偏磷酸盐的总和，既不包含正磷酸盐的含量，因生物体中均含有一定量的正磷酸盐，传统方法中通过用双氧水和硫酸将磷酸盐的多聚体转化为正磷酸盐，测定总磷含量对多聚磷酸盐的含量进行判定已不能满足实际需求。目前我国还没有现行的检测水产品中多聚磷酸盐含量的国家标准和行业标准。有一些科研工作者曾尝试不同的前处理方法，对海产品进行提取后用核磁共振法直接检测多聚磷酸盐，但由于设备昂贵，效果也不甚理想。因此目前还缺少一种适应当前食品安全控制要求的准确度较高的检测方法。

离子色谱法能较好的分离无机阴离子，且能对离子的不同形态进行分析。近年来有文献报道采用抑制型离子色谱-电导法对水产品中多聚磷酸盐进行分离和测定。另外有研究人员采用离子色谱法分析水产品、酱油中的包含丙酸在内的有机酸。索德成等人采用高效液相色谱法对饲用酸化剂中丙酸和柠檬酸进行了同时测定，但该法不能用于多聚磷酸盐的测定。目前，关于丙酸盐、柠檬酸盐和多聚磷酸盐同时测定的方法还未见报道。本文首次建立了一种碱液快速超声辅助萃取-串联式固相萃取-离子色谱法（UAE-SPE-IC）同时检测水产品中的丙酸盐、柠檬酸盐和多聚磷酸盐的检测方法，该法分离效果良好，灵敏度高，不需特殊试剂，在短时间内即可同时完成水产品中丙酸盐、柠檬酸盐和多聚磷酸盐的定量分析，避免了样品的重复处理和测定，大大提高了检测效率，有效降低了检测成本，加快进出口水产品的通关速度。

国内已经在申报的相关的发明专利有申请号201210014139.2、申请日2012-01-18公开的一种检测酸腌菜中亚硝酸盐、硝酸盐的方法，但是这些方法实际检测时灵敏度不高，对于同时检测水产品中的硝酸盐、亚硝酸盐和多聚磷酸盐快速检测应用难度较大。

发明内容

本发明提供一种水产品中丙酸盐、柠檬酸盐和多聚磷酸盐同时测定的检测方法，该方法定量分析结果可靠、检测限低、适用于同时测定水产品中丙酸盐、柠檬酸盐和多聚磷酸盐（包括正磷酸盐、焦磷酸盐、三聚磷酸盐和三偏磷酸盐）的快速检测。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种水产品中丙酸盐、柠檬酸盐和多聚磷酸盐同时测定的检测方法，该方法包括如下步骤：