[发明专利]一种五味子中5-羟甲基糠醛的含量检测方法

说明书

本发明公开了一种五味子中5‑羟甲基糠醛的含量检测方法，采用高效液相法测定五味子中5‑羟甲基糠醛，色谱条件，采用C18柱或C8，流动相为5‑15∶95‑85的甲醇‑0.5%醋酸水溶液或体积比为10‑15:90‑85乙腈‑水溶液，等度洗脱，检测波长为280‑284nm。该方法操作简便、灵敏度高，重现性好。

技术领域

本发明涉及中药材化学成分的检测，特别涉及五味子中的检测方法。

背景技术

五味子[Schisandra chinensis(Turcz.)Baill.]为木兰科五味子属（Schisandra）多年生左旋落叶木质藤本植物，其成熟果实干燥后作药用，因其果实甘、酸、辛、苦、咸五味俱全，故名五味子，主产于黑龙江、吉林、辽宁等地，习称“北五味子”。具有收敛固涩、益气生津、补肾宁心的功能。用于久嗽虚喘、梦遗滑精、遗尿尿频、久泻不止、自汗、盗汗、津伤口渴、短气脉虚、内热消渴、心悸失眠等症。五味子多为9月前后成熟，为浆果，果实含水量较高，采收后需及时加工干燥以利于贮存保证药材品质。传统多采用阴干、晒干等方式，因其需要大量劳动力且受天气情况影响干燥过程不易控制，现多采用烘干的方式进行干燥。但是不同的干燥时间和干燥温度对药材品质具有重要影响。

5-羟甲基糠醛（5-HMF），又称5-羟甲基-2-糠醛，是由葡萄糖等单糖化合物在高温或弱酸等条件下产生的一个醛类化合物，是Maillard反应的典型产物之一。文献中表述该化合物对人体横纹肌和内脏有损害，具有神经毒性，能与人体蛋白质结合产生积蓄中毒，2010年版中国药典二部中明确规定了它在含葡萄糖注射液中的限量。此外，近年来也有研究表明，它具有抗氧化、抗心肌缺血、改变血液流变学等对人体有益的作用。目前5-HMF测定主要为UV法和HPLC法，五味子应用广泛，在加工干制的过程中会产生5-HMF，但是五味子药材中5-HMF的含量测定未见文献报道，因此本实验采用HPLC-UV建立五味子药材中5-HMF的含量测定方法，对于研究炮制作用机理，规范炮制工艺，控制饮片炮制质量具有一定意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种简便、快速、准确、重复性好的五味子中5-羟甲基糠醛的含量检测方法。

本发明提供的五味子中5-羟甲基糠醛含量的检测方法，包括以下步骤

(A)供试品溶液的制备；

(B)对照品溶液的制备；

(C)高效液相色谱法测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，按照一定的色谱条件测定，外标法定量，计算，即得。

上述步骤（A）为取过60目筛的五味子药材粉末，冰浴超声或冰浴振摇提取，将得到提取离心，过滤，定容，过0.45μm滤膜，取续滤液作为供试品溶液。

进一步的，上述步骤（A）为取过60目筛的五味子药材粉末0.5-1.5g，精密称定，置离心管中，加入甲醇12mL，冰浴超声或冰浴振摇提取，每次20-30min，共提取3-4次，合并提取液，离心，过滤，至50mL容量瓶中，用甲醇加至刻度，摇匀，过0.45μm滤膜，取续滤液作为供试品溶液。

更进一步的，上述步骤（A）为取过60目筛的五味子药材粉末约1.00g，精密称定，置离心管中，加入甲醇12mL，冰浴超声提取，每次25min，共提取3次，合并提取液，离心，过滤，至50mL容量瓶中，用甲醇加至刻度，摇匀，过0.45μm滤膜，取续滤液作为供试品溶液。

上述步骤（B）为精密称取5-HMF对照品，加甲醇溶解，定容，摇匀即得。

进一步的，取5-HMF对照品5.00-8.00mg，精密称定，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并定容至10mL，摇匀。从中精密吸取3mL置50mL量瓶中,加甲醇至刻度，摇匀即得，4℃储藏备用。