[发明专利]一种从犊牛血液中提取转移因子的方法在审
| 申请号: | 201410099557.5 | 申请日: | 2014-03-17 |
| 公开(公告)号: | CN103919805A | 公开(公告)日: | 2014-07-16 |
| 发明(设计)人: | 颜宏鲁;方银昌;谢晓兰;杨玉;邢燕;姚作雄 | 申请(专利权)人: | 定西普瑞生化制品有限责任公司 |
| 主分类号: | A61K35/14 | 分类号: | A61K35/14;A61P37/04;A61P3/00 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 744300 甘肃省定*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 犊牛 血液 提取 转移因子 方法 | ||
1.一种从犊牛血液中提取转移因子的方法,其特征在于:该方法包括以下步骤:
1)原料预处理:向采集的犊牛血液中添加肝素钠,并在低温条件下放置;
2)匀浆:经预处理的原料中加入相当于其1倍体积的体积分数为80%的冷冻乙醇和相当于其3倍体积的体积分数为40%的冷冻乙醇,然后进行高速匀浆3min;
3)酸碱度调节:将经步骤2)处理的匀浆液进行酸碱度调节,具体为调节其pH值在5.0~5.1范围内;
4)离心分离:将已调节pH值的匀浆液在冰浴中放置30~60min后,在0~4℃条件下离心20min,然后取其上清液,加等体积的去离子水冷冻干燥,即可得到干燥的提取物;
5)超滤:将干燥的提取物溶解于去离子水中,按每克提取物加2ml去离子水的比例配制成均匀的溶液,然后用超滤膜进行超滤,超滤后得到的TF溶液再经过冷冻干燥,即可得到TF冻干粉,即为粗品;
6)上述步骤所得的粗品经过琼脂糖凝胶柱sephadex G50色谱进一步纯化分离,即可得到纯度在98%以上的转移因子提取物。
2.如权利要求1所述的一种从犊牛血液中提取转移因子的方法,其特征在于:步骤1)中所述的原料预处理工序中,肝素钠的添加量为12.5U/mL血液。
3.如权利要求1所述的一种从犊牛血液中提取转移因子的方法,其特征在于:步骤1)中所述的原料预处理工序中,低温放置时间为30~60min。
4.如权利要求1所述的一种从犊牛血液中提取转移因子的方法,其特征在于:步骤1)中所述的原料预处理工序中,所述的低温温度为-20~-10℃。
5.如权利要求1所述的一种从犊牛血液中提取转移因子的方法,其特征在于:,其特征在于:步骤4)中所述的离心分离工艺中,离心机的转速为2300~2500rpm/min。
6.如权利要求1所述的一种从犊牛血液中提取转移因子的方法,其特征在于:步骤5)中所述的超滤膜是孔径为0.02um的中空纤维膜。
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