[发明专利]一种重组人柯萨奇病毒B组蛋白及其应用有效
| 申请号: | 201410098277.2 | 申请日: | 2014-03-17 |
| 公开(公告)号: | CN103834671A | 公开(公告)日: | 2014-06-04 |
| 发明(设计)人: | 张秀杰;华艳;张晓刚 | 申请(专利权)人: | 北京英诺特生物技术有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/41 | 分类号: | C12N15/41;C07K14/085;C12N15/70;C12N1/20;C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/19 |
| 代理公司: | 北京君智知识产权代理事务所 11305 | 代理人: | 吕世静 |
| 地址: | 100070 北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 重组 人柯萨奇 病毒 组蛋白 及其 应用 | ||
1.一种编码重组人柯萨奇病毒B组蛋白的重组DNA,其特征在于该重组DNA的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示。
2.包含权利要求1所述重组DNA的人柯萨奇病毒B组蛋白的表达载体,其特征在于它是将权利要求1所述的重组DNA插入到质粒pET-30a上得到的重组pET-30a-COXB质粒。
3.一种重组人柯萨奇病毒B组蛋白,其特征在于它由权利要求1所述重组DNA编码,其氨基酸序列如SEQIDNO:2所示。
4.一种重组人柯萨奇病毒B组蛋白的制备方法,包括以下步骤:
1)获得具有SEQIDNO:1所示核苷酸序列的重组DNA;
2)将所述重组DNA导入质粒,构建表达载体;
3)将所得到的重组质粒导入原核宿主细胞;;
4)在有利于所述核苷酸序列表达的条件下培养所述宿主细胞,表达由所述重组DNA编码的重组人柯萨奇病毒B组蛋白;
5)回收、纯化及复性所表达的重组蛋白。
5.如权利要求4所述的方法,其特征在于所述原核宿主细胞是大肠杆菌细胞BL21(DE3)菌株。
6.如权利要求4所述的方法,其特征在于所述质粒为pET-30a质粒。
7.一种表达重组人柯萨奇病毒B组蛋白的工程菌株,其特征在于该菌株含有权利要求2所述的表达载体pET-30a-COXB,该工程菌株的菌种保藏号为CGMCCNo.8892。
8.一种检测人柯萨奇病毒B组感染的试剂盒,其特征在于其组分中的抗原是根据权利要求3所述的重组人柯萨奇病毒B组蛋白,用于标记所述重组人柯萨奇病毒B组蛋白的标记物选自胶体金或辣根过氧化物酶(HRP)。
9.将权利要求2所述的人柯萨奇病毒B组蛋白用于检测人柯萨奇病毒B组感染的用途。
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