[发明专利]紫丹参甲素磺酸钠的制备方法

权利要求书

1.一种紫丹参甲素磺酸钠的制备方法，其包括下述步骤：采用高效液相反相色谱法分离丹参酮类磺化液，即可；

其中，高效液相反相色谱法的条件如下：

流动相A为0.1%三乙胺-水、流动相B为0.1%三乙胺-甲醇；或，流动相A为0.1%二乙胺-水、流动相B为0.1%二乙胺-甲醇；或，流动相A为0.1%乙胺-水、流动相B为0.1%乙胺-甲醇；或，流动相A为水、流动相B为甲醇；百分比为组分占流动相的体积百分比；检测波长为271nm，保留时间为50～70min。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的高效液相反相色谱法包括富集纯化、中间纯化和精制纯化；其中，所述的富集纯化的条件如下：

流动相A为0.1%三乙胺-水、流动相B为0.1%三乙胺-甲醇；或，流动相A为0.1%二乙胺-水、流动相B为0.1%二乙胺-甲醇；或，流动相A为0.1%乙胺-水、流动相B为0.1%乙胺-甲醇；或，流动相A为水、流动相B为甲醇；流速为80～120mL/min，检测波长为271nm；

将丹参酮类磺化液与流动相A按体积比为1:4的混合物上样29～30min，80%流动相A+20%流动相B平衡1min，以流动相A和流动相B按照下述体积比进行线性梯度洗脱45min：80%A+20%B→35%A+65%B，再以100%流动相B再生10min，收集保留时间为50～70min的洗脱液得到富集纯化样品溶液；

所述的中间纯化的条件如下：

流动相A为0.1%三乙胺-水、流动相B为0.1%三乙胺-甲醇；或，流动相A为0.1%二乙胺-水、流动相B为0.1%二乙胺-甲醇；或，流动相A为0.1%乙胺-水、流动相B为0.1%乙胺-甲醇；或，流动相A为水、流动相B为甲醇；流速为80～120mL/min，检测波长为271nm；

将所述的富集纯化样品溶液与流动相A按体积比为1:1的混合物上样28min，80%流动相A+20%流动相B平衡1～2min，以流动相A和流动相B按照下述体积比进行线性梯度洗脱40min：80%A+20%B→40%A+60%B，再以100%流动相B再生10min，收集保留时间为50～65min的洗脱液得到中间纯化样品溶液；

所述的精制纯化的条件如下：

流动相A为0.1%三乙胺-水、流动相B为0.1%三乙胺-甲醇；或，流动相A为0.1%二乙胺-水、流动相B为0.1%二乙胺-甲醇；或，流动相A为0.1%乙胺-水、流动相B为0.1%乙胺-甲醇；或，流动相A为水、流动相B为甲醇；流速为20～30mL/min，检测波长为271nm；

将所述的中间纯化样品溶液与流动相A按体积比为1:1的混合物上样20min，80%流动相A+20%流动相B平衡4min，以流动相A和流动相B按照下述体积比进行线性梯度洗脱35min：80%A+20%B→45%A+55%B，再以100%流动相B再生10min，收集保留时间为50～60min的洗脱液得到精制纯化样品溶液。

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的富集纯化采用的装置如下：采用PrepStar SD-1制备系统和L&L4002色谱柱，装PLRP-S反相C18聚合物填料160.0g，动态轴向压缩系统装填至压力650psi，静态锁紧至柱床高度25cm；柱温为10～30℃；

和/或，所述的中间纯化采用的装置如下：采用PrepStar SD-1制备系统和L&L4002色谱柱，装PLRP-S反相C18聚合物填料160.0g，动态轴向压缩系统装填至压力650psi，静态锁紧至柱床高度25cm；柱温为10～30℃；

和/或，所述的精制纯化采用的装置如下：采用PrepStar SD-1制备系统和L&L4001色谱柱，装ODS-AQ反相C18硅胶填料80.0g，动态轴向压缩系统装填至压力650psi，静态锁紧至柱床高度25cm；柱温为10～30℃。

4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的富集纯化中，所述的流速为100mL/min；

和/或，所述的中间纯化中，所述的流速为100mL/min；

和/或，所述的精制纯化中，所述的流速为25mL/min。