[发明专利]细胞培养基及其在培养人原代肿瘤细胞中的应用

权利要求书

1.一种细胞培养基，其特征在于：原料配方为：DMEM/High Glucose（DMEM高糖培养基）33.33ml；HAM’S/F-12培养基66.67ml；植物源重组人血清白蛋白3～5mg/mL；青霉素100U/ml；链霉素100μg/ml；两性霉素B2.5μg/mL；氢化可的松0.2～0.5μg/ml；胰岛素3～6μg/ml；霍乱毒素B6～10ng/ml；人表皮生长因子EGF9～12ng/ml；腺嘌呤22～25μg/ml；Y-276327～9μmol/L。

2.根据权利要求1所述的细胞培养基，其特征在于：所述原料配方为：DMEM/High Glucose（DMEM高糖培养基）33.33ml；HAM’S/F-12培养基66.67ml；植物源重组人血清白蛋白5mg/mL；青霉素100U/ml；链霉素100μg/ml；两性霉素B2.5μg/mL；氢化可的松0.4μg/ml；胰岛素5μg/ml；霍乱毒素B8.4ng/ml；人表皮生长因子EGF10ng/ml；腺嘌呤24μg/ml；Y-276327μmol/L。

3.权利要求1或2所述的细胞培养基在培养人原代肿瘤细胞或肿瘤干细胞中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：具体应用方式如下：用权利要求1或2的细胞培养基重悬人原代肿瘤细胞后，接种到用权利要求1或2的细胞培养基培养8小时后的细胞饲养层上进行培养；

所述细胞饲养层的制备方法为：采用DMEM培养基培养BALB3T3细胞，细胞贴壁培养至铺满培养瓶70%～80%时，以3000cGy作为放射剂量进行X线照射；照射后的BALB3T3细胞若暂时不进行原代细胞培养使用，则用原DMEM培养基继续培养或收集冻存；若进行原代细胞培养使用，则改用权利要求1或2的细胞培养基培养8小时后，所得培养物即为细胞饲养层。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述放射剂量为3000cGy。

6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述进行X线照射的具体方式为：照射时仪器从0开始加量，达到需要的放射剂量立即停止。

7.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述采用细胞培养基进行培养的培养条件为：保持温度37℃，CO₂浓度为5%。