[发明专利]一种弓形虫检测试剂盒有效

专利信息
申请号: 201410081706.5 申请日: 2014-03-06
公开(公告)号: CN104897891A 公开(公告)日: 2015-09-09
发明(设计)人: 索勋;刘贤勇;尹青 申请(专利权)人: 中国农业大学
主分类号: G01N33/569 分类号: G01N33/569
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人: 王文君
地址: 100193 *** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 弓形虫 检测 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种弓形虫检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括:弓形虫抗原、IFN-γ捕获抗体、IFN-γ标准品、生物素标记的IFN-γ检测抗体。

2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括:细胞培养基、阳性对照物、阴性对照物、包被液、封闭液、HRP标记的链霉亲和素、显色液和终止液。

3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述阳性对照物为刀豆蛋白A。

4.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述细胞培养基含有胎牛血清、青链霉素、β-巯基乙醇。

5.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述弓形虫抗原包括弓形虫表面糖蛋白SAG1、SAG2;缓殖子期特异性蛋白BAG1;致密颗粒蛋白GRA1、GRA3-GRA7、GRA10、GRA15;棒状体蛋白ROP1、ROP2、ROP7、ROP16、ROP18;微线蛋白MIC1-4、MIC6、MIC8;棒状体颈部蛋白RON4;顶端膜抗原AMA1和热应激蛋白HSP70。

6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述弓形虫抗原是通过超声裂解弓形虫速殖子或缓殖子虫体、或者利用大肠杆菌原核表达并纯化后制备得到的。

7.根据权利要求1-6任意一项所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒的使用方法为:

(1)无菌采集动物或人的抗凝血;

(2)全血稀释后铺细胞培养板;

(3)用弓形虫抗原对动物或人外周血或外周血中分离的细胞进行刺激,使其中的弓形虫特异性T细胞释放出IFN-γ;

(4)收集培养细胞的上清;

(5)ELISA定量检测样品中IFN-γ的含量;

(6)根据试剂盒设置的阴阳性对照品刺激IFN-γ的水平,比较IFN-γ比值差异,判断动物或人是否感染过弓形虫。

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