[发明专利]一种弓形虫检测试剂盒有效
| 申请号: | 201410081706.5 | 申请日: | 2014-03-06 |
| 公开(公告)号: | CN104897891A | 公开(公告)日: | 2015-09-09 |
| 发明(设计)人: | 索勋;刘贤勇;尹青 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
| 主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569 |
| 代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君 |
| 地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 弓形虫 检测 试剂盒 | ||
1.一种弓形虫检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括:弓形虫抗原、IFN-γ捕获抗体、IFN-γ标准品、生物素标记的IFN-γ检测抗体。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括:细胞培养基、阳性对照物、阴性对照物、包被液、封闭液、HRP标记的链霉亲和素、显色液和终止液。
3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述阳性对照物为刀豆蛋白A。
4.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述细胞培养基含有胎牛血清、青链霉素、β-巯基乙醇。
5.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述弓形虫抗原包括弓形虫表面糖蛋白SAG1、SAG2;缓殖子期特异性蛋白BAG1;致密颗粒蛋白GRA1、GRA3-GRA7、GRA10、GRA15;棒状体蛋白ROP1、ROP2、ROP7、ROP16、ROP18;微线蛋白MIC1-4、MIC6、MIC8;棒状体颈部蛋白RON4;顶端膜抗原AMA1和热应激蛋白HSP70。
6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述弓形虫抗原是通过超声裂解弓形虫速殖子或缓殖子虫体、或者利用大肠杆菌原核表达并纯化后制备得到的。
7.根据权利要求1-6任意一项所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒的使用方法为:
(1)无菌采集动物或人的抗凝血;
(2)全血稀释后铺细胞培养板;
(3)用弓形虫抗原对动物或人外周血或外周血中分离的细胞进行刺激,使其中的弓形虫特异性T细胞释放出IFN-γ;
(4)收集培养细胞的上清;
(5)ELISA定量检测样品中IFN-γ的含量;
(6)根据试剂盒设置的阴阳性对照品刺激IFN-γ的水平,比较IFN-γ比值差异,判断动物或人是否感染过弓形虫。
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