[发明专利]一种口服重组融合蛋白TAT-MAP30及制备方法和应用

权利要求书

1.一种合成的基因，其序列为SEQ ID NO.1所示。

2.权利要求1所述基因编码的蛋白质，其序列为SEQ ID NO.2所示。

3.含有权利要求1所述基因的基因工程菌：大肠杆菌Escherichia coli BL21（DE3）pET-28a-TAT-MAP30 ，F^- ompT hsdS_B(r_B^-m_B^-)gal dcm(DE3)；CCTCC NO: M2013546。

4.权利要求2所述蛋白的制备方法，其步骤为：

    1）诱导

 接种50ul 重组基因工程菌于20ml  Kan抗性的LB液体培养基中，37℃ 200rpm 培养过夜；

 第二天，按照4%的比例，即4ml发酵液于100ml培养基中，该培养基中加有100ul 浓度为1mol/ml的Kan，于37℃ 200rpm的条件下培养2小时；

 当菌液OD600约为0.6时，取出三角瓶冰浴10分钟，再加入20ul浓度为1mol/ml的IPTG，于18℃ 200rpm的条件下诱导发酵20～24小时；

2）提取可溶性重组融合蛋白

 将200mL 重组基因工程菌发酵液于室温8000rpm离心40 分钟，收集湿菌体；

 用80mL Lysis Buffer重悬菌体，并将菌液转移至破碎杯中；

 在低温高速离心机中，以4℃ 10000rmp的条件，将破碎液离心20分钟；

 收集上清，弃掉沉淀；

经镍柱纯化，透析，浓缩后即得一种TAT-MAP30融合蛋白，其序列为SEQ ID NO.2所示；

所述的重组基因工程菌为：大肠埃希氏菌Escherichia coli BL21（DE3）pET-28a-TAT-MAP30，F^- ompT hsdS_B(r_B^-m_B^-)gal dcm(DE3)；CCTCC NO: M2013546。

5.权利要求1所述的基因或权利要求2所述蛋白在制备抑制金黄色葡萄糖球菌生长药物中的应用。

6.权利要求1所述的基因或权利要求2所述蛋白在制备抗对虾白斑综合征病毒药物中的应用。