[发明专利]一种高产β-葡萄糖苷酶酵母菌株的筛选方法

权利要求书

1.一种高产β-葡萄糖苷酶酵母菌株的筛选方法，其特征在于：所述的筛选方法包括以下操作步骤：(1)培养基的配制；(2) 非酿酒酵母菌的纯化，得单菌落；(3) 单菌落的活化；(4) 在96孔板中添加培养基和活化后的单菌落；(5) 通过颜色筛选高产糖苷酶菌株。

2.根据权利要求1所述的一种高产β-葡萄糖苷酶酵母菌株的筛选方法，其特征在于：

所述的步骤（1）培养基的配制：将重量百分比为0.3%的七叶苷，重量百分比为0.05%的柠檬酸铁，重量百分比为0.2%的NaCl，重量百分比为0.05%的MgSO₄.7H₂O，重量百分比为0.1%的KH₂PO₄和重量百分比为2%的琼脂加水混合后在121℃灭菌20min，得培养基；

所述的步骤（2）非酿酒酵母菌的纯化：将非酿酒酵母菌先在WL营养琼脂培养基上培养5天，得单菌落；

所述的步骤（3）单菌落的活化：根据单菌落颜色、菌落大小、突起、边缘及其形态的不同，分别挑取不同的单菌落，在添加YPD液体培养基的试管中活化，每只试管添加YPD液体培养基5mL，活化两天；

所述的步骤（4）在96孔板中添加培养基和活化后的单菌落：在96孔板中，每孔添加250μl培养基；再添加经活化后的单菌落15μl，每个活化后的单菌落添加两个孔，与作为对照，同时涂布均匀，记录好每个单菌落与96孔板相对应的编号；

所述的步骤（5）通过颜色筛选高产糖苷酶菌株：培养3天后，选择呈现颜色深的棕黑色单菌落，得胶红酵母和膜璞毕赤酵母，胶红酵母和膜璞毕赤酵母均为高产β-葡萄糖苷酶酵母菌株。

3.根据权利要求1所述的一种高产β-葡萄糖苷酶酵母菌株的筛选方法，其特征在于：所述的非酿酒酵母菌为美极梅奇酵母、葡萄汁有孢汉逊酵母、东方伊萨酵母或假丝酵母。