[发明专利]一种甘草活性物质的制备方法

权利要求书

1.一种甘草活性物质的制备方法，包括：

原料的预处理；将甘草予以筛选，去除各种杂质、用水洗净、干燥、粉碎过60目筛；

热水浸提处理；甘草热水浸提处理，得到浸提液Ⅰ，浸提温度为75-95℃，料液比为1:5-1:15，浸提次数为1-3次，每次浸提时间为3h，浸提液Ⅰ通过200目滤布过滤得到粗滤液Ⅰ，滤渣备用；

甘草渣的超声辅助浸提处理；得到的滤渣用于超声辅助浸提，得到浸提液Ⅱ，超声功率300-500W，浸提温度为60-80℃，料液比为1:10-1:20，浸提次数为1-2次，每次浸提时间为20-30min，浸提液Ⅱ通过200目滤布过滤得到粗滤液Ⅱ，滤渣弃去；

醇沉处理；粗滤液Ⅰ经过离心处理，转速4200r/min，离心10min，得到澄清液Ⅰ，澄清液Ⅰ经过真空蒸发器浓缩，浓缩温度为45℃，真空度为0.08MPa，浓缩至可溶性固形物为30-40Brix，得到浓缩液Ⅰ，浓缩液Ⅰ加入75-95%乙醇使之乙醇终浓度达到50%，常温静置4h，以4200r/min离心10min，沉淀物按照固液比1:5用75%乙醇复溶，90℃回流30min，离心过滤，上清液并入第一次醇沉上清液，沉淀备用，将第一次醇沉上清液通过真空蒸发器浓缩至25-35Brix，进行第二次醇沉，加入75-95%乙醇使之终浓度达到70%，常温静置4h，以4200r/min离心10min，沉淀物按照固液比1:5用75%乙醇复溶，90℃回流30min，离心过滤，上清液并入第二次醇沉上清液得最终醇沉上清液Ⅰ，两次乙醇复溶的沉淀物合并，为最终醇沉沉淀物Ⅰ；

纯化处理；将最终醇沉沉淀物Ⅰ于室温下用60-90%乙醇洗涤1-3次，收集沉淀物，采用真空冷冻干燥工艺进行干燥处理，冷阱温度为-40℃～-80℃，干燥时间为36-48h，得到甘草多糖。

2.如权利要求1所述一种甘草活性物质的制备方法，其特征在于：还包括酸沉处理、复溶处理、氨化处理、酸化处理和结晶的步骤，其中，

酸沉处理；将最终醇沉上清液Ⅰ采用真空蒸发器浓缩以除乙醇，浓缩温度为45℃，真空度为0.08MPa，浓缩至可溶性固形物为浓缩至30-35Brix，使乙醇浓度低于5%，得浓缩液Ⅱ，将浓缩液Ⅱ用去离子水进行稀释使可溶性固形物达到15Brix，使用体积比1:1硫酸水溶液，搅拌添加，调稀释液pH值至1.5-2.5，得到酸沉液Ⅰ；

复溶处理；将酸沉液Ⅰ于4℃静置12h，以转速4200r/min，进行离心分离20min，得上清液Ⅰ和沉淀Ⅰ，上清液Ⅰ备用，沉淀Ⅰ用有机溶剂Ⅰ进行复溶，按照固液比1:3搅拌溶解沉淀Ⅰ30-60min，使之完全溶解，得有机液Ⅰ；

氨化处理；将有机溶液Ⅰ用浓氨水调pH至7.5-9.0，搅拌1h，静止分层，得到上相Ⅰ、下相Ⅰ；

酸化处理；将上相Ⅰ使用冰醋酸调pH值至4.0以下，70-90℃水浴保温30min，低温静置6-12h，得酸化液Ⅰ；

结晶；酸化液Ⅰ加入无水乙醇稀释，使乙醇浓度达到90%，低温静置4-8h，以4200r/min离心20min，离心后得到上清液Ⅱ和沉淀，离心后的沉淀进行真空冷冻干燥，真空度为0.014MPa，冷阱温度为-40℃～-60℃，干燥时间为20-30h，沉淀干燥后即得甘草酸单铵盐。

3.如权利要求2所述一种甘草活性物质的制备方法，其特征在于：还包括纯化步骤，上清液Ⅰ、粗滤液Ⅱ、下相Ⅰ和上清液Ⅱ合并，浓缩至干并用50%乙醇复溶，利用大孔树脂进行纯化，树脂选用XDA-8，LX20B，D101，AB-8其中一种，室温下振荡8-12h进行静态吸附，70-90%乙醇室温下振荡8-12h进行解吸，收集洗脱液进行真空蒸发器浓缩以除去乙醇，浓缩温度为45℃，真空度为0.08MPa，浓缩至可溶性固形物为30-35Brix，进行喷雾干燥。喷雾干燥进口温度160-200℃，出口温度80-85℃，干燥后得甘草黄酮。