[发明专利]正青霉属真菌次生代谢产物的生物合成方法

权利要求书

1.一种正青霉属真菌次生代谢产物的生物合成方法，其特征在于：步骤如下：

（1）菌株的培养：将正青霉属真菌Eupenicilliumsp.接种于装有培养基的三角瓶内，摇床培养；

（2）有机溶剂的诱导：在步骤（1）中的摇床培养之前或之后，向三角瓶中的菌液内加入有机溶剂进行诱导刺激；

（3）目标化合物的分离纯化与结构鉴定：将步骤（2）中得到的菌液进行抽滤，采用乙酸乙酯萃取，合并有机相；同时向滤出的干燥菌丝体中加入适量的乙醇，进行超声处理，合并两种有机相，利用旋转蒸发仪除去溶剂；选用硅胶柱，在由石油醚/乙酸乙酯组成的洗脱体系下对目标化合物进行分离纯化，并通过光谱学方法鉴定其结构，结构如下：

2.根据权利要求1所述的正青霉属真菌次生代谢产物的生物合成方法，其特征在于：所述步骤（1）中的培养基为PDA培养基。

3.根据权利要求1所述的正青霉属真菌次生代谢产物的生物合成方法，其特征在于：所述步骤（1）中的摇床培养在温度为20-40℃，摇床速度为100-120rpm的条件下进行，优选在温度为30℃，摇床速度为110rpm的条件下进行。

4.根据权利要求1所述的正青霉属真菌次生代谢产物的生物合成方法，其特征在于：所述步骤（2）中的有机溶剂选自二甲基亚砜或丙酮。

5.根据权利要求1所述的正青霉属真菌次生代谢产物的生物合成方法，其特征在于，相对于菌液而言，所述步骤（2）中加入的有机溶剂的浓度为0.5‰-3%v/v，优选0.5‰-1%v/v，更优选1‰v/v。

6.根据权利要求1所述的正青霉属真菌次生代谢产物的生物合成方法，其特征在于：所述步骤（2）中的诱导刺激进行24-120h，优选120h。

7.根据权利要求1所述的正青霉属真菌次生代谢产物的生物合成方法，其特征在于：所述步骤（3）使用1-2倍于菌液体积的乙酸乙酯进行萃取，优选使用等体积的乙酸乙酯，并且所述萃取进行2-5次，优选2-3次。

8.根据权利要求1所述的正青霉属真菌次生代谢产物的生物合成方法，其特征在于：所述步骤（3）中的分离纯化过程使用200-300目硅胶，所述洗脱体系为石油醚:乙酸乙酯=3:1。

9.根据权利要求1所述的正青霉属真菌次生代谢产物的生物合成方法，其特征在于：所述步骤（3）中的结构鉴定方法包括¹H谱、¹³C谱、DEPT谱、HMQC谱、COSY谱和ESI-MS谱。