[发明专利]一类海洋真菌来源的Berkeleyones化合物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于药物化合物技术领域，具体涉及一类海洋真菌来源的Berkeleyones化合物及其制备方法和应用。 

背景技术

红树林是热带、亚热带海湾、河口泥滩上特有的常绿灌木和小乔木群落，具有呼吸根或支柱根，一般分布于高潮线与低潮线之间的潮间带。在中国，红树林主要分布在海南岛、广西、广东和福建。作为海洋真菌中的第二大类群，红树林真菌由于生长条件独特，活性代谢产物非常丰富，在海洋资源开发方面有着重要的意义。目前科学家已从其里面的各种内生真菌代谢产物中分离出很多结构新颖、有显著活性的化合物，许多已进入临床试验阶段。 

Berkeleyones 化合物最初来源于从伯克利的矿井湖分离的青霉菌，这种菌株在恶劣的环境下依然可以存活，其代谢产物很可能有活性物质，因此研究人员进行了深入研究并发现了新结构的Berkeleyones化合物，并认为这类化合物在真菌体内发挥着重要作用（Donald B. Stierle, etal. Org. Lett., 2004,6,1049-1052）。目前这类结构的化合物已报道的只有15个（Donald B. Stierle, etal. J. Nat. Prod., 2007, 70, 1820-1823; Donald B. Stierle, etal. J. Nat. Prod., 2011, 74, 2273-2277; Motoo lida, etal. Org. Lett., 2008, 10, 845-848; Yi Zhang, etal. J. Nat. Prod., 2012, 75, 1888-1895）。 

癌症是严重威胁人类生命的常见病和多发病。研发高效、低毒、特异性强的新型抗癌药物是当今抗肿瘤药物研究的重要方向。海洋天然产物作为药物先导化合物的重要来源之一，对新型药物的研发有着重要的作用。 

发明内容

本发明的目的在于提供一类新的海洋真菌来源的Berkeleyones化合物。所述Berkeleyones化合物是从一种南海红树林内生真菌菌核青霉Penicillium sclerotiorum.SJ 0167中分离得到的，该化合物对乳腺癌细胞（MDA-MB-435）、肝癌细胞(HepG2)、结肠癌细胞（HCT-116）和肺腺癌细胞（A549）均表现出较好的抗癌活性，可应用于制备抗癌药物。 

本发明的另一个目的是提供上述Berkeleyones化合物的制备方法。 

本发明还有一个目的是提供上述Berkeleyones化合物的应用。 

本发明的上述目的通过如下技术方案予以实现： 

一类Berkeleyones化合物，其结构式如式（I）所示：

。

本发明所用的真菌菌核青霉Penicillium sclerotiorum.SJ 0167是从南海红树林内分离出的一种内生真菌，分类命名为菌核青霉Penicillium sclerotiorum，该菌株已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC）保藏，保藏日期是2013年12月23日，保藏号是CGMCC NO: 8628；保藏单位地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。 

上述Berkeleyones化合物的制备方法，包括如下步骤： 

S1. 真菌Penicillium sclerotiorum.SJ 0167菌株接入种子培养基，摇床培养，得到种子培养液；

S2. 将种子培养液接入发酵培养基中，静置培养得发酵物；

S3. 将发酵物用甲醇浸泡提取，甲醇提取液浓缩后经乙酸乙酯萃取、浓缩，得到浸膏，再经层析分离，得到式（I）所示Berkeleyones化合物1和化合物2。

步骤S1所述种子培养基采用本领域常规的GYT培养基即可，室温培养5~7天；常规GYT培养基的组成按重量比为：葡萄糖18~23g，蛋白胨4~5g，酵母膏1~2g，海盐55~65g，水1.5~2L。步骤S1所述摇床培养是室温下，摇床转速100~150rpm，培养时间为5~7天。 

作为一种优选方案，上述制备方法中，步骤S2所述发酵培养基为固体大米培养基，其组分为：大米50~70g，海盐1.5~2g，水50~70mL。步骤S2所述静置培养的时间为1~2个月，静置培养的温度为室温。