[发明专利]一种紫贻贝脂溶性提取物的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种具有抗炎活性的紫贻贝脂溶性提取物的制备方法。

背景技术

嵊泗县是我国贻贝最大的生产基地，有“中国贻贝之乡”之美誉。嵊泗贻贝主要以养殖紫贻贝和厚壳贻贝为主，但由于厚壳贻贝生长周期长，目前还主要以紫贻贝为主，2013年产量约11.2万吨。嵊泗贻贝目前主要消费方式是鲜销和加工成冻贻贝或干贻贝销售，但由于贻贝经济价值较低，鲜品在终端销售价格仅为2元/斤左右。发掘贻贝卖点，提高贻贝经济价值迫在眉睫。炎症是困扰人类的一大类病症的总称，关节炎、哮喘等均属于此类病症。而贻贝中含有具有Lyprinol活性的抗炎物质。因此，以嵊泗贻贝为原料，开发抗炎类药物具有重大的经济意义和社会意义。

关于贻贝中抗炎活性物的提取已有前人研究，袁高峰等发表的“厚壳贻贝脂溶性提取物抗炎生物活性研究”（浙江大学报（农业与生命科学版） 33（2）：169～173,2007）指出：以厚壳贻贝为原料，经过冷冻干燥和氯仿∶甲醇（2∶1，V∶V）提取了厚壳贻贝脂溶性提取物，并验证了其抗炎活性；中国专利申请号为200910101136.0，公开日为2009年12月23日的“厚壳贻贝脂溶性提取物及其制备方法和用途”发明专利申请书中也公开了通过冷冻干燥和超临界二氧化碳萃取等方法制备的厚壳贻贝脂溶性提取物，但由于脂溶性抗炎物质主要为不饱和脂肪酸，而这些方法或存在提取方法过于简单，导致脂肪酸发生氧化，或存在提取方法过于复杂，提取成本高的弊端。

发明内容

本发明针对上述缺点，在保证脂溶性抗炎物质活性的基础上，提供一种低成本的具有抗炎活性的紫贻贝脂溶性提取物的制备方法。

一种紫贻贝脂溶性提取物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1）紫贻贝预处理：将紫贻贝捕捞上来后进行清洗、脱壳、采肉、去足丝；然后将贻贝肉进行绞碎处理，得紫贻贝碎肉；

2）复合酶酶解：将贻贝碎肉加入水中，然后加入复合酶进行搅拌、调PH值、保温、酶解，酶解前加入Vc，酶解后舍弃液体，得到不溶于水的粗脂肪；

3）将所述粗脂肪用有机溶剂溶解，溶解时添加VE，然后经冷冻、-5～-10℃条件下过滤得到紫贻贝提取物粗品，然后经过水浴回流蒸发掉有机溶剂后即得到紫贻贝脂溶性提取物。

作为优选，步骤1）中所述的绞碎处理是采用搅拌机以10000r/min速率搅拌30s，停机，再开机30s，停机，如此往复3次。

作为优选，步骤2）中所述的复合酶是由风味酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、动物复合蛋白酶的两种或两种以上进行复配而成。

作为优选，步骤2）中，所述复合酶添加比例为0.5%～1%，pH为5.0～6.5，温度保持40℃～45℃，酶解时间为0.5～1.5小时。

作为优选，步骤3）中所述的有机溶剂为乙酸乙酯或丙酮或乙醚。

作为优选，步骤3）中所述的冷冻温度为-20℃～-30℃，冷冻时间为5～8小时，水浴回流时间2～3小时。

作为优选，所述步骤2）中酶解前加入1%的Vc，所述步骤3）中溶解时添加1%的VE。

通过本发明所述方法提取得到的紫贻贝脂溶性提取物具有纯度较高、成本低、氧化率低的特点，具有较强的流动性，经气相色谱分析含有26种不饱和脂肪酸，纯度达到95.21%。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。

实施例1：

第一步：紫贻贝预处理：将紫贻贝捕捞上来后进行清洗、脱壳、采肉、去足丝；然后将贻贝肉进行绞碎处理，得到紫贻贝碎肉。

第二步：复合酶酶解：首先将紫贻贝碎肉采用搅拌机以10000r/min速率搅拌30s，停机，再开机30s，停机，如此往复3次；然后将1份贻贝碎肉加入9份水后加入复合酶，复合酶选择风味酶10000IU/g、碱性蛋白酶5000IU/g和动物复合蛋白酶100000IU/g作为复合酶，复配比例为1∶1∶0.1，复合酶添加比例0.5%，同时加入质量分数为1%的Vc；搅拌后调pH值为5.0，温度保持在40℃，酶解时间0.5小时；酶解结束后过滤，舍弃液体，取固体粗脂肪备用。

第三步：粗脂肪用5倍质量的乙酸乙酯溶解，同时加入粗脂肪质量1%的VE，置于-20℃温度下冷冻5小时后，在-5℃温度下过滤后得到紫贻贝提取物粗品，再经水浴回流后2小时候得到紫贻贝提取物。

实施例2：

第一步：紫贻贝预处理：将紫贻贝捕捞上来后进行清洗、脱壳、采肉、去足丝；然后将贻贝肉进行绞碎处理，得到紫贻贝碎肉。