[发明专利]异香豆素类新抗生素和田霉素（Hetiamacin）B、C、D 及其制备和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一组天然来源的异香豆素类（isocoumarin）新抗生素及其制备方法，以及其在制备抗革兰氏阳性细菌及其耐药菌感染药物中的应用。 

背景技术

以“ESKAPE”为代表的耐药菌日益猖獗，严重威胁着全球感染性疾病的治疗。自1961年在英国首次发现耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（Methicillin-resistant Staphylococcus aureus，MRSA）以来，MRSA占临床上分得金黄色葡萄球菌的比例由20世纪80年代中期的1%～5%迅速迅速增加至目前的60%～70%，美国每年超过94000人感染MRSA，19000人死亡。据我国细菌耐药性监测网（CHINET）报告显示：2011年我国临床耐甲氧西林金葡菌MRSA分离率高达50%以上，部分MRSA对糖肽类抗生素低水平耐药，即万古霉素中介的金黄色葡萄球菌（VISA），可见MRSA感染也是我国细菌耐药的突出问题。虽然万古霉素、利奈唑胺、达托霉素和替加环素等少数药物经美国FDA批准已用于临床治疗MRSA感染，但近年来临床上已发现上述药物的耐药菌株，尤其是1996年万古霉素不敏感金黄色葡萄球菌（VISA）及2002年第1株耐万古霉素金黄色葡萄球菌（VRSA）的出现。MRSA已经成为严重威胁人类生命健康的“超级细菌”，与艾滋病、病毒性乙型肝炎并称为世界三大感染性疾病，成当今感染医学一个难题。因此研究开发针对MRSA的新的抗菌药物刻不容缓。 

Amicoumacin是一类来源于微生物的异香豆素类化合物。该类化合物具有异香豆素（isocoumarin）类母核结构，自1975年发现第一个 该类抗生素baciphelacin以来，已报道了20多种来源于微生物的Amicoumacin类化合物，它们具有抗菌、抗肿瘤，抗疟，抗病毒，抗炎，溃疡保护，植物生长调节等广泛的生物活性，尤其是抗MRSA的活性极为突出。1975年武田制药株式会社Hisayoshi Okazaki等发现的第一个Amicoumacin类抗生素Baciphelacin对耐药（耐青霉素、链霉素和大环内酯类抗生素）金黄色葡萄球菌有很好的抑制；而后1981年日本明治制菓株式会社（Meiji Seika Kaisha,Ltd.）Jiro Itoh等从短小芽孢杆菌Bacillus pumilus BN-103中首次分离到Amicoumacin A，对金黄色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus）和表皮葡萄球菌（Staphylococcus epidermidis）的MIC值均小于1μg/mL；2007年日本武蔵野大学（Musashino University）的Makoto Hasimoto等活性研究表明，Amicoumacin A耐甲氧西林金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus ATCC43300的抗菌活性与万古霉素相当，MIC值分别为4和2.5μg/mL；另外，1992年日本山之内制药株式会社Tutomu Sato等从芽孢杆菌Bacillus sp.Y-05460M-A中分离得到的Y-05460M-A，2012年香港科技大学Li Yongxin等分离到的Bacilosarcins B，以及1981年美国专利报道的Amicoumacin类抗生素Kristenin，都具有抗金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）或者抗MRSA的强活性。 

本发明人从一株植物叶片内生枯草芽孢杆菌的次级代谢产物中分离得到三个Amicoumacin类抗生素—和田霉素（Hetiamacin）B、C、D，经紫外光谱、红外光谱、高分辨质谱及核磁共振等波谱学数据的仔细分析，确定和田霉素（Hetiamacin）B、C、D为Amicoumacin类新抗生素，该结构与本发明人已经发表的Amicoumacin类抗生素Hetiamacin A（参见发明人的专利申请CN102977082A）相似，其侧链都有一个独特的六氢嘧啶环，但是与Hetiamacin A侧链的成环位点不同。对Hetiamacin B、C、D进行抗菌活性评价发现，三者对葡萄球菌属，包括甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）、甲氧西林敏感表皮葡萄球菌（MSSE）、耐甲氧西林表 皮葡萄球菌（MRSE）都有抑制活性，其中Hetiamacin B的抗菌活性最强，MIC值均在1-2μg/ml范围内。因此，Hetiamacin B、C、D有望成为抗革兰氏阳性细菌如葡萄球菌属及其耐药菌（MRSA）感染的药物及先导化合物并具有潜在的良好开发前景。 

发明内容