[发明专利]油菜转基因检测试剂盒有效
| 申请号： | 201410044476.5 | 申请日： | 2014-02-05 |
| 公开（公告）号： | CN103757127A | 公开（公告）日： | 2014-04-30 |
| 发明（设计）人： | 黄广平;秦子苏;王勇强 | 申请（专利权）人： | 黄广平 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 610000 四川省资阳*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 油菜 转基因 检测 试剂盒 | ||
1.一种油菜转基因检测试剂盒由引物组合和膜芯片组成，其特征在于引物组合为11重双启动寡核苷酸引物组合，各对引物的碱基序列5’-3’如下，其中碱基I为次黄嘌呤核苷酸：
EPSPS：正向引物： CTTTCTGGAACCGTCCGTATIIIIIGTGACAA
反向引物：CCAAGTATCACCTTCCTTACIIIIICTGGCAC；
GOX：正向引物：CTGCTGCTCCTAACTGGAAGIIIIITCACGTT
反向引物：GGTCATTGGAGCACCAGTCAIIIIIAGGTGAC；
PAT：正向引物： TGAGACGTCTACAGTGAACTIIIIIACAGAGC
反向引物：CTTCCAGGGCCCAGCGTAAGIIIIICCAGCCA；
NPTII：正向引物： CGAAGTGCCGGGGCAGGATCIIIIITCATCTC
反向引物：CGCGAGCCCCTGATGCTCTTIIIIIAGATCAT；
BAR：正向引物： GACGACCTCGTCCGTCTGCGIIIIIGCTATCC
反向引物：CAGCAGGTGGGTGTAGAGCGIIIIICCCAGTC；
BARNASE：正向引物： ATTATCGTGGATTTCCGTTTIIIIICTGGTGC
反向引物：GCTTATGATATGTCTGAAGAIIIIICGCAACC；
BARSTAR：正向引物： CCTGGACGCTTTATGGGATTIIIIIACCGGAT
反向引物：TTCCGCTTTCGCTTCACGGAIIIIITGAAGCA；
FMV35S：正向引物： GGAAGAATTCTCAGTCCAAAIIIIIAACAAGG
反向引物： CAAAGATGCCCACTAACTTTIIIIITTCGGTG；
CaMV35S：正向引物：GATAAAGGAAAGGCCATCGTIIIIIATGCCTC
反向引物：TGGGATTGTGCGTCATCCCTIIIIICAGTGGA；
NOS 3’：正向引物： TTAAGATTGAATCCTGTTGCIIIIITTGCGAT
反向引物：CGCGCGCGATAATTTATCCTIIIIIGCGCGCT；
PEP：正向引物： ATACGCTACAACTACCAATAIIIIICGAGTGG
反向引物：GGAAAAAAGGTCGAGAAGTTIIIIICACGAGG；
膜芯片为顺序固定在支持膜表面的11组探针序列和一组阳性对照（Positive）探针序列，11组探针序列和阳性对照探针序列的碱基序列5’-3’如下，各探针的5’端做氨基标志：
EPSPS探针: NH2-5’-TATCACCGGTCTTTTGGAAGGTGAAGATGTTATCAACA
CTGGTAAGGCTATGCAAGCTA-3’；
GOX探针: NH2-5’-CCCTTCCAGTGATTGGTCGTGCTACCCGTACTCCAGACG
TTATCTACGCTTTCGGTCAC-3’；
PAT探针: NH2-5’-GGATTGATGATCTAGAGAGGTTGCAAGATAGATACCCTT
GGTTGGTTGCTGAGGTTGAG-3’；
NPTII探针: NH2-5’-CACCAAGCGAAACATCGCATCGAGCGAGCACGTACTC
GGATGGAAGCCGGTCTTGTCGA-3’；
BAR探针: NH2-5’-CGCAACGCCTACGACTGGACGGCCGAGTCGACCGTGTA
CGTCTCCCCCCGCCACCAGCG-3’；
BARNASE探针: NH2-5’-AACGGAAACATCTTCTCACAAGGCACACACAGAA
GCACAGGTTATCAACACGTTTGACG-3’；
BARSTAR探针: NH2-5’-CGTTTTGGAATGGAGGCAGTTTGAACAAAGCAAG
CAGCTGACTGAAAATGGCGCCGAGA-3’；
FMV35S探针: NH2-5’-CAAAGTAAACTACTGTTCCAGCACATGCATCATGGT
CAGTAAGTTTCAGAAAAAGACAT-3’；
CaMV35S探针: NH2-5’-AGGAGCATCGTGGAAAAAGAAGACGTTCCAACC
ACGTCTTCAAAGCAAGTGGATTGATG-3’；
NOS 3’探针: NH2-5’-ATGAGATGGGTTTTTATGATTAGAGTCCCGCAATTATA
CATTTAATACGCGATAGAAAA-3’；
PEP探针: NH2-5’-GAGATTTTTCCAAGGCTTCAAACTCTTTCATCACATGTC
TCTTCTCTTTCCATTGTCTT-3’；
Positive探针: NH2-5’-TAGCAAGGATGAGTATTCGAACAGTTAGAGGCAGT
CAGGGAGAATCACTACGTACAAGC-3’。
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