[发明专利]硫代二酮哌嗪类化合物及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明涉及微生物代谢产物技术，具体的说是硫代二酮哌嗪类化合物及其制备方法和用途。 

背景技术

肿瘤是威胁人类健康的主要疾病之一。从天然产物中寻找、发现抗肿瘤药物一直是药学研究领域的热点之一。海洋微生物具有资源丰富、种类繁多的特点。海洋具有高盐、高压、低温、寡营养等特点，赋予了海洋微生物独特的代谢途径，其代谢产物的化学结构具有复杂、多样的特点，因此，从海洋微生物及其代谢产物中研究发现化学结构新颖、生物活性显著的天然活性物质提供了有力条件。另一方面，海洋微生物易于人工大规模培养，代谢过程可人工调控，不受生长季节及自然生物量的限制，较易于解决药源问题。 

发明内容

本发目的在于提供一种硫代二酮哌嗪类化合物及其制备方法和用途。 

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：1.一种硫代二酮哌嗪类化合物，其特征在于：硫代二酮哌嗪类化合物为式I所示的化合物1或化合物2 

式I。 

2.一种权利要求1所述的硫代二酮哌嗪类化合物的制备方法，其特征在于包括如下步骤： 

1）将青霉Penicillium broca经发酵培养，而后将发酵液用乙酸乙酯萃取3-4次，合并提取液进行浓缩，获得发酵液粗提物及菌丝体； 

菌丝体用丙酮-水（80-20）超声破碎提取3-4次，合并提取液后旋蒸除去丙酮，然后用乙酸乙酯萃取3-4次，合并萃取液再进行浓缩，获得菌丝体粗提物； 

所述青霉(Penicillium brocae)保藏于中国普通微生物菌种保藏管 理中心，保藏日期：2014年1月17日，保藏号为：CGMCC8736； 

2）将步骤1）中的发酵液粗提物和菌丝体粗提物合并后，进行减压硅胶柱层析，采用的洗脱液依次是梯度为20:1至1:1(v/v)的石油醚-乙酸乙酯和梯度为20:1至1:1(v/v)的氯仿-甲醇； 

3）将步骤2）中以氯仿-甲醇10：1(v/v)梯度洗脱下的组分以甲醇-水（甲醇-水的比例）作为洗脱液进行反相柱层析，收集甲醇-水40：60(v/v)洗脱得到的组分，再用硅胶柱层析纯化，硅胶柱层析纯化的洗脱液是梯度为60:1至10:1(v/v)的氯仿-甲醇，即得纯化目标化合物1和2。 

3.按权利要求1所述的硫代二酮哌嗪类化合物的制备方法，其特征在于：所述收集氯仿-甲醇30:1(v/v)洗脱得到的组分即为化合物2；收集氯仿-甲醇10:1(v/v)洗脱得到的组分即为化合物1。 

4.按权利要求1所述的硫代二酮哌嗪类化合物的应用，其特征在于：所述式I所示的化合物在制备细胞增殖抑制剂或肿瘤细胞杀伤剂中的应用。 

5.按权利要求1所述的硫代二酮哌嗪类化合物的应用，其特征在于：所述式I所示的化合物在制备抑制肿瘤细胞增殖药物中的应用。 

6.按权利要求1所述的硫代二酮哌嗪类化合物的应用，其特征在于：所述式I所示的化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。 

本发明涉及用青霉(Penicillium brocae)制备硫代二酮哌嗪类化合物的方法及该类化合物在制备细胞增殖抑制剂或抗肿瘤剂中的用途。 

本发明采用MTT法测试化合物1和2对8株供试细胞株：人胶质瘤细胞（U251）、人肝癌细胞株（HepG2）、人胰腺癌细胞株（SW1990）、人宫颈癌细胞株（HeLa）、人前列腺癌细胞株（DU145）、人非小细胞肺癌细胞株（NCI-H460）、人乳腺癌细胞株（MCF-7）及人胃癌细胞株（SGC-7901）的抗肿瘤活性，试验证明，化合物1和2对肿瘤细胞有选择性增殖抑制作用。 

因此本发明的硫代二酮哌嗪类化合物1和2可用作细胞增殖抑制剂或肿瘤细胞杀伤剂。同时，化合物1和2可以制成抗肿瘤药物用于肿瘤的治疗。化合物1和2可溶于二甲亚砜或二甲亚砜的含水溶液加以利用。 

本发明所具有的优点： 

本发明从采自海南新盈红树林白骨壤茎中分离获得一株青霉属真菌Penicillium brocae，该菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2014年1月17日，保藏号为：CGMCC8736，对其进行发酵培养、化学成分分离、结构鉴定与生物活性研究，发现了两个结构新颖的硫代二酮哌嗪类化合物具有很好的抗肿瘤活性，目前尚未见对 该化合物的化学结构及细胞增殖抑制活性的报道，因此市场上也尚未见有与此相关的药物。