[发明专利]一种提高高雄山虫草体表侵染家蚕产子实体率的方法有效
申请号: | 201410037117.7 | 申请日: | 2014-01-26 |
公开(公告)号: | CN103865801A | 公开(公告)日: | 2014-06-18 |
发明(设计)人: | 梁建东;韩燕峰;梁宗琦;王玉荣;杜文 | 申请(专利权)人: | 贵州大学 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;A01K67/04;C12R1/645 |
代理公司: | 贵阳东圣专利商标事务有限公司 52002 | 代理人: | 袁庆云 |
地址: | 550025 贵州省*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 高雄 虫草 体表 侵染 家蚕 产子 实体 方法 | ||
1.一种提高高雄山虫草体表侵染家蚕产子实体率的方法,包括以下步骤:
(1)高雄山虫草GZUIFR-PT211菌丝段接种液的制备:
在PDA培养基上活化高雄山虫草GZUIFR-PT211菌种,然后将活化好的菌种接种到液体种子培养基中,摇床常规培养3-4天后即可备用;制备菌丝段接种液:使用菌丝段生产培养基,接种量20ml/l,摇床转速为200 r/min,26℃下培养96h,将培养好的发酵液用灭菌的双层滤纸过滤即得到高雄山虫草GZUIFR-PT211的菌丝段接种液;
(2)体表侵染及子实体的人工培养
选取大小均一的蚕蛹,用5%的聚维酮碘液擦涂或喷施于蚕蛹体表,作用5min后用无菌水漂洗3次,再用1mol/l NaOH擦涂或喷施于蚕蛹体表,作用5min后用无菌水漂洗3次,沥干水分后,取蚕蛹浸蘸浓度大于106个菌丝段/ml的高雄山虫草GZUIFR-PT211菌丝段溶液,而后置于用滤纸加无菌水保湿的容器内,在20-23℃培养,3-5天后大部蚕蛹变硬,再保湿培养3-5天后从蛹体的节间先长出菌丝体和很细小的子实体,此时将感染的蚕蛹放入较大容器,进行12h见光培养,12h暗培养,在暗培养阶段降低培养温度5℃培养,在侵染20-25天时已生长旺盛,到25-30天时子实体大部分表面披一层白色的孢子粉,此时,子实体已经成熟。
2.如权利要求1所述的一种提高高雄山虫草体表侵染家蚕产子实体率的方法,其中:第(1)步中的液体种子培养基为常规马铃薯培养基。
3.如权利要求1或2所述的一种提高高雄山虫草体表侵染家蚕产子实体率的方法,其中:第(1)步中的生产培养基配方为:葡萄糖为32.83g/l,硝酸铵为3.19g/l,K2HPO4 1g/l,KCl 0.5 g/l,CaCl2 0.5 g/l,FeSO4 0.01 g/l,初始pH为6。
4.如权利要求3所述的一种提高高雄山虫草体表侵染家蚕产子实体率的方法,其中:高雄山虫草GZUIFR-PT211,保藏号:CCTCC No:M 2011217。
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