[发明专利]辅助筛选和培育抗条锈病小麦新品系的专用引物、试剂和试剂盒及其选育方法

权利要求书

1.一种辅助筛选和选育抗条锈病小麦新品系的引物对，所述引物对为Xcfd141和/或Xgwm71；

其中，Xcfd141-F：CGTAAAGATCCGAGAGGGTG；

Xcfd141-R：TCCGAGGTGCTACCTACCAG；

Xgwm71-F：CAAGTGGAGCATTAGGTACACG；

Xgwm71-R：GGCAGAGCAGCGAGACTC。

2.一种用于辅助筛选和选育抗条锈病小麦新品系的试剂，包括试剂1和/或试剂2；

所述试剂1为包括引物对Xcfd141的PCR试剂1；

所述试剂2为包括引物对Xgwm71的PCR试剂2。

3.根据权利要求2所述的试剂，其特征在于：所述PCR试剂1由所述引物对Xcfd141、dNTP、DNA聚合酶和PCR扩增缓冲液组成；所述PCR试剂2由所述引物对Xgwm71、dNTP、DNA聚合酶和PCR扩增缓冲液组成；

所述PCR试剂1、PCR试剂2中dNTP中的每一种在其所在的PCR试剂中的终浓度均为0.2mM；所述DNA聚合酶在以上PCR试剂中的终浓度为0.067U/μl。

4.一种用于辅助筛选和选育抗条锈病小麦新品系的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括权利要求2或3中所述的PCR试剂1和/或PCR试剂2。

5.一种辅助筛选抗条锈病小麦新品系的方法，是用权利要求1所述引物对、权利要求2和3所述试剂或权利要求4所述试剂盒对待测小麦进行PCR扩增，电泳检测PCR扩增产物中目标抗性基因存在与否：分别以不携带分子标记连锁基因和携带分子标记连锁基因的材料为阴阳性对照，如果待测小麦与携带分子标记连锁基因材料带型一致确定为或候选为抗条锈病小麦，如果待测小麦和不携带分子标记材料带型一致确定为或候选为非抗条锈病小麦。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述PCR扩增的程序为：94℃预变性5min；随后45个循环：94℃变性1min，50℃退火1min，72℃延伸2min；最后延伸8min。

7.一种辅助选育高产和／或抗条锈病小麦的方法，其特征在于：步骤如下：

1）以陇鉴127与另一丰产优质待测小麦亲本进行杂交，得到F₁代；

2）将步骤1）得到的F₁代小麦进行自交，得到F₂代小麦；

3）用权利要求1所述引物对、权利要求2和3所述试剂或权利要求4所述试剂盒对步骤2）得到的F₂代小麦进行PCR扩增，电泳检测PCR扩增产物：

如果PCR扩增的产物带型与陇鉴127一致，则所述待测小麦为或候选为抗条锈病小麦；

如果PCR扩增的产物带型与陇鉴127扩增带性不一致，则所述待测小麦为或候选为非抗条锈病小麦；

4）将步骤3）得到的候选为抗条锈病F₂代小麦进行自交得到F₃代小麦，将所述F₃代小麦自交得到F₄代小麦，将所述F₄代小麦自交得到F₅代小麦，将所述F₅代小麦自交得到F₆代小麦；

5）用权利要求1所述引物对、权利要求2和3所述试剂或权利要求4所述试剂盒对步骤4）得到的F₆代小麦进行PCR扩增，得到PCR产物，电泳检测PCR扩增产物：

如果PCR扩增的产物带型与陇鉴127扩增带型一致，则所述待测小麦为或候选为抗条锈病小麦；

如果PCR扩增的产物带型与陇鉴127扩增带型不一致，则所述待测小麦为或候选为非抗条锈病小麦；

6）将所述候选为抗条锈病F₆代小麦进行自交，得到F₇代小麦，筛选产量高于丰产优良亲本的F₇代小麦，即为高产、抗条锈病小麦；

所述条锈病的病原菌为小麦条锈菌，所述小麦条锈菌具体为小麦条锈菌小种条中32号。