[发明专利]金黄色葡萄球菌肠毒素B的B细胞免疫优势表位肽及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种金黄色葡萄球菌肠毒素B的B细胞免疫优势表位肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO：17所示。

2.根据权利要求1所述的金黄色葡萄球菌肠毒素B的B细胞免疫优势表位肽，其特征在于，所述B细胞免疫优势表位肽的核心表位的氨基酸序列如SEQ ID NO：48所示。

3.一种金黄色葡萄球菌肠毒素B的B细胞免疫优势表位肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO：35所示。

4.根据权利要求3所述的金黄色葡萄球菌肠毒素B的B细胞免疫优势表位肽，其特征在于，所述B细胞免疫优势表位肽的核心表位的氨基酸序列如SEQ ID NO：54所示。

5.一种金黄色葡萄球菌肠毒素B的B细胞免疫优势表位肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO：42所示。

6.根据权利要求5所述的金黄色葡萄球菌肠毒素B的B细胞免疫优势表位肽，其特征在于，所述B细胞免疫优势表位肽的核心表位的氨基酸序列如SEQ ID NO：69所示。

7.一种鉴定权利要求1-6任一项所述的金黄色葡萄球菌肠毒素B的B细胞免疫优势表位肽的方法，其特征在于，包含步骤：

1）用金黄色葡萄球菌肠毒素B的突变体免疫小鼠获得抗血清；

2）步移合成覆盖金黄色葡萄球菌肠毒素B全长序列的重叠18肽；

3）用步骤1）所得的抗血清结合步骤2）所得的重叠18肽筛选金黄色葡萄球菌肠毒素B的B细胞免疫优势表位肽；

4）用步骤3）所筛得的B细胞免疫优势表位肽与钥孔血蓝蛋白偶联，所得偶联物用于动物免疫，获得免疫优势肽抗血清；所述免疫优势表位抗血清进行金黄色葡萄球菌肠毒素B的中和能力检测，鉴定所述B细胞免疫优势表位肽为目标B细胞免疫优势表位肽。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，进一步包含步骤：

5）针对步骤3）所得的B细胞免疫优势表位肽序列，从N-端及C-端分别依次截断2个氨基酸，合成各B细胞免疫优势表位肽所对应的截断肽；

6）用步骤4）获得的所述免疫优势肽抗血清结合步骤5）所述的截断肽，来确定所述B细胞免疫优势表位肽的最小表位；

7）用步骤6）所筛得的B细胞免疫优势表位肽的最小表位与钥孔血蓝蛋白蛋白偶联，所得偶联物用于动物免疫，获得免疫优势表位抗血清；

8）用步骤7）获得的所述免疫优势表位抗血清进行金黄色葡萄球菌肠毒素B的中和能力检测；

9）用生物信息学方法确定步骤6）所确定的B细胞免疫优势表位肽的最小表位在金黄色葡萄球菌各个菌株中的保守性，并明确其在金黄色葡萄球菌肠毒素B蛋白三维结构中的位置。

9.权利要求1-6任一项所述的金黄色葡萄球菌肠毒素B的B细胞免疫优势表位肽在制备金黄色葡萄球菌肠毒素B表位疫苗和/或预防疫苗中的应用。

10.一种金黄色葡萄球菌肠毒素B表位疫苗和/或预防疫苗，其特征在于，含有权利要求1-6任一项所述的金黄色葡萄球菌肠毒素B的B细胞免疫优势表位肽。