[发明专利]龟甲胶多肽的制备方法和制药新用途

说明书

技术领域

本发明涉及制备龟甲胶多肽的方法，以及龟甲胶多肽的新用途。

背景技术

动物胶原类物质是动物的基本组成成分，是动物及人体组织结构的基础，如，空腔器官、血管、骨骼、脏器等，其分子结构是进化中最保守的，因而在人类应用中是最不易引起过敏反应的一类物质，在我国中医药中被广泛应用，如取自驴皮的阿胶、龟甲动物的龟甲胶等，均广泛用于我国中医药散结化瘀、创伤修复、补血养颜等方面。

龟甲胶的主要成分是蛋白质、骨胶原、脂肪、钙、磷、肽类和多种酶以及多种人体必需微量元素。龟甲胶水溶液中含有多肽、氨基酸、微量元素等成分，有抗凝血、增加冠脉含量、提高耐缺氧功能、促进免疫等作用，可以广泛用于营养食品和药品。

发明内容

本发明目的在于提供一种龟甲胶的酶解方法，以及该方法制备得到的龟甲胶多肽及其制备抗肿瘤药物的用途。

本发明酶解龟甲胶的方法，包括如下步骤：

（1）取龟甲胶，加水煮沸溶解，得龟胶液；

（2）调节龟胶液pH至6.9～9.0，在48～52℃的条件下，加入广西酶至浓度为0.3～3.0g/L，恒温反应0.5～4h；

（3）再调节溶液pH至8.0～9.0，在53～57℃的条件下，加入碱性蛋白酶至浓度为0.3～3.0g/L，恒温反应0.5～4h；

（4）然后再调节溶液pH至6.0～9.0，在48℃～52℃的条件下，加入风味酶至浓度为0.3～3.0g/L，恒温反应0.5～4h；

（5）升温至75～90℃，保温3～15分钟，使酶失活；

（6）抽滤，得滤液，浓缩，干燥，即得龟甲胶多肽。

步骤（1）中，龟胶液的浓度为50～120g/L。优选地，所述龟胶液的浓度为80g/L。

步骤（2）中，所述pH优选为7.3～7.7，进一步优选为7.5；所述温度优选为49～51℃，进一步优选为50℃；所述广西酶的浓度优选为0.55～0.75g/L，进一步优选为0.64g/L；所述反应的时间优选为1.5～2.5h，进一步优选为2h。

步骤（3）中，所述pH优选为8.0～8.2，进一步优选为8.0；所述温度优选为54～56℃，进一步优选为55℃；所述碱性蛋白酶的浓度优选为1.5～1.7g/L，进一步优选为1.6g/L；所述反应的时间优选为1.5～2.5h，进一步优选为2h。

步骤（3）中，所述碱性蛋白酶为alcalase。

步骤（4）中，所述pH优选为6.8～7.2，进一步优选为7.0；所述温度优选为49～51℃，进一步优选为50℃；所述风味酶的浓度优选为0.3～0.5g/L，进一步优选为0.4g/L；所述反应的时间优选为1.5～2.5h，进一步优选为2h。

步骤（5）中，所述温度为80℃，所述保温时间为10min。

本发明还提供了前述任意一项方法制备得到的龟甲胶多肽。

本发明还提供了前述龟甲胶多肽在制备抗肿瘤的特殊膳食食品、药品或者保健品中的用途。其中，所述肿瘤未肉瘤或者肺癌。

特殊膳食营养品，是指在肿瘤治疗过程中的具有营养支持作用的营养食品。

本发明还提供了龟甲胶多肽在制备用于肿瘤辅助治疗的特殊膳食食品、药品或者保健品中的用途。其中，所述肿瘤未肉瘤或者肺癌。

本发明还提供了一种抗肿瘤或者用于肿瘤辅助治疗的药品、特殊膳食食品或者保健品，它是以前述龟甲胶多肽为活性成分，加上药品、食品或保健食品上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。

本发明方法制备得到的龟甲胶多肽，可以有效抑制肿瘤的生长，对肉瘤和肺癌的疗效确切，副作用小，为临床抗肿瘤或肿瘤辅助治疗的药物、特殊膳食食品或保健食品提供了一种新的选择，临床应用前景良好。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

附图说明

图1龟甲胶多肽组与对照组的肿瘤（肉瘤）大小比对图；

图2龟甲胶多肽组与对照组的实验解剖图；

图3龟甲胶多肽组与对照组小鼠外观比对图；

图4龟甲胶多肽组和对照组肿瘤（肺癌）组织外观图；

图5龟甲胶多肽组与对照组肿瘤（肺癌）镜下观察比对图（400倍镜下）。

具体实施方式