[发明专利]检测用碱性橙Ⅱ标准样品的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测用标准样品的制备方法，特别是涉及一种检测用碱性橙Ⅱ标准样品的制备方法。

背景技术

标准样品是具足够均匀的一种或多种化学的、物理的、生物学的、工程技术的或感官的等性能特征，经技术鉴定，并附有说明有关性能数据证书的一批样品。是以其性质与供试样品进行比较的质量均一的实物样品，并且有适合使用目的的纯度。

碱性橙Ⅱ是一种偶氮类碱性工业染料，俗名“王金黄”、“块黄”等。一般用于腈纶纤维的染色和织物的直接印花，也用于蚕丝，羊毛和棉纤维的染色，还用于皮革、纸张、羽毛、草、木、竹等制品的染色。过量摄取、吸入以及皮肤接触该物质均会造成急性和慢性的中毒伤害，为致癌物。根据我国的相关标准，该物质并未列入食品添加剂范围之内。由于碱性橙Ⅱ比其它水溶性染料如柠檬黄、日落黄等更易于在豆腐以及一些水产品上染色且不易褪色，一些不法商贩用该物质对豆制品等食品进行染色，以求获得更好的卖相，欺骗消费者。

因此，及时准确判断食品中是否存在这种非食用色素，建立快速、准确的食品中非食用色素碱性橙Ⅱ的测定方法是非常必要的。而进行定量方法的开发就需要高纯度的标准品，采用标准样品，才能保证检测结果在国际交往中的准确性、可比性、可溯源性。

发明内容

本发明的目的在于提供一种检测用碱性橙Ⅱ标准样品的制备方法，该方法制得纯度高、含量准确、均匀性和稳定性均符合要求的标准样品，解决我国检测用标准品依赖进口，为我国食品安全检验检测提供全面实物标准保障，为我国各级政府食品安全监控提供了技术支撑。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

检测用碱性橙Ⅱ标准样品的制备方法，其所述方法包括碱性橙Ⅱ的合成与纯化过程：

在三口反应瓶内加入水、盐酸和苯胺，搅拌；滴加亚硝酸钠溶液，用碘化钾淀粉试纸确定反应终点；加入尿素除去多余的亚硝酸钠，将此重氮液放入冰箱中冷藏；在另一三口反应瓶内加入水、间苯二胺，搅拌，升温至间苯二胺全部溶解，然后降温并以盐酸调节pH值，缓慢加入重氮液，继续搅拌至重氮液完全反应，随后加入水，升温加入盐酸，搅拌均匀，静置，结晶，过滤，盐析过滤后干燥得产品；粗品经过重结晶分离后，采用薄层色谱进行分离，甲醇与二氯甲烷比列为1：7时，样品进行硅胶柱净化，甲醇与三氯甲烷混合液梯度洗脱，洗脱液氮吹后干燥的纯品；取粗品与硅胶搅拌均匀后，装柱后依次用石油醚润洗、二氯甲烷洗涤后，用二氯甲烷/甲醇洗脱目的物；将上述制得碱性橙Ⅱ标准品，用棕色瓶进行分装，每瓶10 mg共115瓶，编号后置于室温、通风密封保存即可。

所述的检测用碱性橙Ⅱ标准样品的制备方法，所述碱性橙Ⅱ的合成与纯化：在三口反应瓶内加入水10mL、36%的盐酸14 g 和苯胺3.5 g，搅拌；保持反应瓶内为0-5℃，于1 h之内滴加入30%的亚硝酸钠溶液20 mL，加完继续反应30 min，用碘化钾淀粉试纸确定反应终点。

所述的检测用碱性橙Ⅱ标准样品的制备方法，所述碱性橙Ⅱ的合成与纯化：在另一三口反应瓶内加入水12.5 mL、间苯二胺4.5 g，搅拌，升温至65℃，至间苯二胺全部溶解，然后降温至-4℃，并以36%的盐酸调节pH值至6-7，开始缓慢加入冷至 -4℃的重氮液，维持三口瓶内反应温度不大于-2℃，加完继续搅拌至重氮液完全反应，随后加入水20 mL，升温至 95℃，加入36%的盐酸0.3 g，搅拌均匀，静置，结晶，过滤，盐析过滤后于60℃干燥，得产品约10 g。

所述的检测用碱性橙Ⅱ标准样品的制备方法，所述碱性橙Ⅱ的合成与纯化：粗品经过重结晶分离后，采用薄层色谱进行分离，甲醇与二氯甲烷比列为1：7时，在薄层上主产物与其他杂质得到分离；样品进行硅胶柱净化，甲醇与三氯甲烷混合液梯度洗脱，洗脱液氮吹后干燥的纯品，取1.2 g粗品与25 g硅胶100-140目搅拌均匀后，装柱后依次用100 mL石油醚润洗、200 mL二氯甲烷洗涤后，用200 mL的二氯甲烷/甲醇7:1洗脱目的物。

附图说明

图1为本发明碱性橙Ⅱ标准样品的制备工艺示意图；

图2为本发明碱性橙Ⅱ标准样品的液相色谱图。

具体实施方式

下面结合附图所示实施例，对本发明作进一步详述。

实施例1：