[发明专利]一种饲料添加剂“地顶孢霉培养物”的生产方法

说明书

技术领域

本发明属于饲料添加剂加工技术领域，具体涉及一种饲料添加剂“地顶孢霉培养物”的生产方法，更具体地说是用地顶孢霉（Acremonium terricola，保藏号CGMCC0346 ）进行液体菌种发酵和固体发酵所获得的地顶孢霉培养物的制作方法。

背景技术

我国农业部颁发《饲料添加剂品种目录》中大部分饲料添加剂为传统的抗生素、化学合成药物等，长期使用此类添加剂会使动物产生抗药性，并存在动物源性耐药细菌的耐药性向人类的转移，给人类的健康形成巨大影响，甚至威胁到人类的生命安全；而且人体经常从肉质中摄入低剂量的抗生素残留物，会逐步在体内蓄积而导致各种器官发生病变，导致过敏反应、免疫抑制、致畸、致癌、致突变等作用。

因此，绿色饲料添加剂是未来发展方向，我国《十二五规划》也将“发展优质安全高效饲料产品”列为行业主要任务之一。规划指出：十二五期间需加强酶制剂、微生物制剂等新型饲料添加剂研发、生产与应用；综合利用微生物制剂等新型安全饲料添加剂产品，减少抗生素等药物饲料添加剂使用。

“地顶孢霉培养物”是我国农业部《饲料添加剂品种目录》所收录的一种绿色饲料添加剂。“地顶孢霉”是一种真菌，经研究发现对其发酵培养所得产物可提高动物机体免疫力、降低料肉比，因此“地顶孢霉培养物”被列入农业部《饲料添加剂品种目录》。

 “地顶孢霉”为中国新纪录种，国外尚无专利报道，国内目前与“地顶孢霉”菌种相关的专利有CN1091150C“地顶孢霉CGMCC0346及分离培养方法和发酵工艺方法”、CN200910008656“一种低胆固醇营养禽蛋的生产方法及其产品”。

其中，专利CN1091150C“地顶孢霉CGMCC0346及分离培养方法和发酵工艺方法”是在地顶孢霉尚未开发成饲料添加剂时申请的，其保护技术包括“地顶孢霉菌种分离方法”和“液体发酵工艺方法”，该专利中的“发酵工艺方法”目的为获得发酵罐培养的菌丝，保护技术包括“一级斜面菌种培养”、“液体揺瓶种子培养”和“发酵罐培养”，只用到一次发酵罐。

专利CN200910008656“一种低胆固醇营养禽蛋的生产方法及其产品”目的在于保护一种低胆固醇禽蛋的生产方法，在其生产过程中用地顶孢霉培养物饲喂了动物，因此介绍了地顶孢霉培养物的获得方法。①该专利中地顶孢霉培养物培养周期为11~15天；②一次液体发酵时间3~4天；③ 采用“20℃~30℃恒温固体发酵”，周期5~7.5天。长期中试试验发现“20℃~30℃恒温固体发酵”恒温固体发酵存在问题：发菌期时间长易污染，对数期生长过快散热不及时易烧盘。即：如低温20℃恒温培养会导致发菌慢，发菌期延长易污染，发菌点少导致后期菌种生长不旺；若高温30℃恒温培养会导致对数期生长散热不及时，温度过高导致烧盘污染、发酵失败；④固体发酵接种量2%~20%。长期中试试验发现低接种量易导致发菌慢、后期长势不旺、终产品有效物质成分含量不达标等问题。

发明内容

本发明提供了一种生产周期短、资源利用率高的饲料添加剂“地顶孢霉培养物”的生产方法，其包括“液体菌种发酵”和“固体发酵”两个步骤。

本发明的一种饲料添加剂“地顶孢霉培养物”的生产方法，包括步骤（1）液体菌种发酵和步骤（2）固体发酵两个步骤，所述菌种为地顶孢霉（Acremonium terricola  CGMCC0346）；所述液体菌种发酵包括一级种子罐发酵和二级种子罐发酵；所述固体发酵为将灭菌后的固体培养基与步骤（1）所得液体发酵菌种混合培养，干燥，粉碎。

所述一级种子罐发酵是指：在50L气升式发酵罐中装入约35L液体培养基， 121℃～126℃灭菌30分钟；灭菌后，冷却至23℃时接种，培养温度为23℃，通气量为1：1 V/V·min，保压0.05～0.1MPa，经24h通气培养，达到对数生长期后即可；

所述二级种子罐发酵是指：在500L种子罐中装入350L液体培养基，121℃～126℃灭菌30分钟；灭菌后，冷却至23℃，将一级种子罐所得的液体种子全部接入二级种子罐培养，培养温度23℃，通气量为1：1 V/V·min，保压0.05～0.1MPa，经过24h通气培养，达到对数生长期后即可；

所述固体发酵是将固体培养基混合均匀后，加入固体培养基质量40%～60%的水，拌匀后灭菌；将灭菌后的固体培养基于无菌通风室中冷却至25-30℃，以25%～50%（质量）的接种量接入经二级种子罐发酵后的液体菌种；将接种后的物料平铺在带孔浅盘中放入培养室中培养；培养72小时后出料、烘干、粉碎即得成品。