[发明专利]一种去除病毒裂解疫苗中裂解剂的方法有效
| 申请号： | 201410020316.7 | 申请日： | 2014-01-16 |
| 公开（公告）号： | CN103736087A | 公开（公告）日： | 2014-04-23 |
| 发明（设计）人： | 张伟;马小伟;潘若文;张勇朝;安文琪;范蓓 | 申请（专利权）人： | 华兰生物疫苗有限公司;华兰生物工程股份有限公司 |
| 主分类号： | A61K39/12 | 分类号： | A61K39/12;A61K39/145;A61P31/12;A61P31/16 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;陈晓庆 |
| 地址： | 453003 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 去除 病毒 裂解 疫苗 方法 | ||
1.一种去除病毒裂解液中裂解剂的方法，包括如下步骤：用裂解剂对病毒原液进行裂解，得到病毒裂解液；以十八碳烷基硅烷键合硅胶为固定相，将病毒裂解液进行固相提取，去除病毒裂解液中的裂解剂。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述固相提取的方法包括如下步骤：将所述病毒裂解液流经所述固定相，收集流穿峰。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述流经的线性流速为0.75cm/min。
4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：所述流经的压力为0.1-0.4bar。
5.根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：所述病毒裂解液与所述固定相的比为：2000ml病毒裂解液：100ml固定相。
6.根据权利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于：所述收集流穿峰为收集AU值大于等于0.06AU的流穿峰。
7.根据权利要求1-6中任一所述的方法，其特征在于：所述方法中，在所述收集流穿峰之后，包括如下淋洗收集步骤：
用溶液C对上样后的固定相进行洗脱，溶液C与固定相的配比为200ml溶液C：100ml固定相；
所述溶液C为磷酸盐缓冲生理氯化钠溶液，pH值为7.2；
当峰值下降至0.06AU时，停止收集。
8.根据权利要求1-7中任一所述的方法，其特征在于：所述方法中，在所述流经前，包括如下固定相活化步骤：
将溶液A和溶液B依次通过所述固定相；
所述溶液A与所述固定相的配比为：200ml溶液A：100ml固定相；
所述溶液B与所述固定相的配比为：300ml溶液B：100ml固定相。
所述溶液A为75%乙醇水溶液，pH值为6.8；
所述溶液B为磷酸盐缓冲生理氯化钠溶液，pH值为7.2。
9.根据权利要求1-8中任一所述的方法，其特征在于：所述病毒原液中的蛋白含量为500-1500ug/ml。
10.根据权利要求1-9中任一所述的方法，其特征在于：所述病毒为流感病毒；所述裂解剂为Triton X-100。
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