[发明专利]一种快速检测食品中磺胺残留量的方法

说明书

技术领域

本发明属于食品安全检测技术领域，涉及食品中残留磺胺的检测方法，特别是涉及荧光衍生及浊点萃取的方法。

背景技术

牛奶、肉制品等动物源食品普遍含有蛋白质、脂肪、氨基酸、糖类、钙、磷、铁等丰富的营养物质，随着人民生活水平的不断提高，其在居民的膳食结构中所占比重也越来越大。磺胺类药物因其具有其廉价、疗效高、疗程短等优点，广泛应用于畜牧业生产中，用于预防和治疗畜禽疫病。磺胺类药物的大量使用导致其在多数动物源食品中均有残留，人们食用磺胺类药物残留量超标的动物源食品后，会对人体健康造成危害。为了避免消费者受到磺胺类药物残留的危害，各国都有相应法规规定最高残留量的标准。欧盟规定牛奶、肉类等食品中磺胺类药物的残留限量为100μg kg^?1。

现有技术中，已应用于磺胺类药物残留检测的技术主要有微生物检测法如TTC法，免疫分析法如ELISA检测法，色谱检测法如HPLC、GC法等。上述方法在检测精密度等方面各有所长，有的灵敏度低、选择性差；有的操作过程步骤较为繁琐，有的需购置昂贵仪器，但大都存在检测耗时长、成本高的缺点，在具体实际应用中造成不便。

浊点萃取法使用表面活性剂来对样品中的分析物进行提取，不使用或只使用少量的有机溶剂，是一种对环境友好的样品前处理方法。本发明采用了壬基酚聚氧乙烯醚NP-7为表面活性剂，其在紫外灯下无荧光强度，不会干扰目标物质的测定，与传统的萃取剂相比有更温和的操作条件和较高检测灵敏度、快速、准确等特点。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种快速检测食品中的磺胺残留量的方法，这是一种有效的新型浊点萃取体系分离富集并结合薄层板检测食品中磺胺残留量的方法，在保证检测准确度和安全性的同时，降低了检测成本，为质监部门提供了一种准确，方便快捷，直观定性定量的测定方法。

本发明快速检测食品中的磺胺残留量的方法包括以下步骤：

（1）样品处理：在含有磺胺残留食品加入溶剂，混匀，离心，取出上清液，备用； 

（2）磺胺荧光衍生物的形成及浊点萃取：配制磺胺浓度0.1～100mg/L的标准水溶液，加入质量体积百分比浓度为0.05%(w/v)的荧光胺甲醇液，用pH缓冲液调节体系至pH3～5，在常温下反应30min，加入非离子表面活性剂及无机盐，涡旋混合2 min，35℃下加热20min，离心分相，去掉上层水相，得到标准品富集相，其中荧光胺甲醇液的添加量为0.1～0.5mL/5mL；

（3）样品磺胺荧光衍生物的形成及浊点萃取：取步骤（1）所得上清液，按照步骤（2）所述的条件进行衍生反应及浊点萃取，得到样品富集相；

（4）磺胺含量判断：在长度≥3cm的薄层硅胶板上点样步骤（2）的标准品富集相和步骤（3）的样品富集相，待溶剂挥干后，在波长365nm紫外灯下对两者的荧光强弱进行比较，磺胺本身在紫外灯下没有荧光，衍生后的磺胺为黄绿色，将样品富集相的黄绿色荧光强度与标准品富集相的黄绿色荧光强度比较，判断磺胺的浓度范围。

步骤（1）中磺胺包括磺胺嘧啶钠SD、磺胺甲基嘧啶SM1、磺胺二甲基嘧啶SM2、磺胺甲恶唑SMZ、磺胺胍SG中的一种或者几种；溶剂为三氯乙酸、无水乙醇、乙腈、甲醇、水中的一种，用量为0.08～0.4mL/mL或0.1～5mL/g。

步骤（2）中pH缓冲液调节体系为硼酸、乙酸以及磷酸按常规方法配制成的三酸缓冲溶液；非离子表面活性剂为壬基酚聚氧乙烯醚（7）醚，即NP-7，用量为0.01～0.2mL/5mL；所述无机盐包括氯化钠、硫酸钠、硫酸铵、氯化铵之一种，用量为0.05～0.3g/5mL。

本发明中所述离心条件为离心时间10～20min，离心速率3000～6000r/min。

步骤（4）所述薄层硅胶板上点样量为30μL，所述样品富集相与标准品富集相点样量相同，样点大小保持一致，直径在0.2～0.6cm，点样分6次完成。

同现有技术相比，本发明具有以下优点或者积极效果：