[发明专利]基于前导肽置换突变的谷氨酰胺转胺酶突变体有效
申请号: | 201410008840.2 | 申请日: | 2014-01-08 |
公开(公告)号: | CN103710322A | 公开(公告)日: | 2014-04-09 |
发明(设计)人: | 陈坚;王广圣;陈康康;刘松;堵国成 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/10;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/55 |
代理公司: | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 11419 | 代理人: | 何自刚;王玉松 |
地址: | 214122 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 前导 置换 突变 谷氨酰胺 转胺酶 突变体 | ||
1.一种基于前导肽置换突变的高比酶活谷氨酰胺转胺酶突变体,其特征在于,编码所述突变体的核苷酸序列为如下(a)或(b)的基因:
(a)核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示的基因;
(b)核苷酸序列为SEQ ID NO.2所示的基因。
2.根据权利要求1所述的突变体,其特征在于,所述突变是将吸水链霉菌谷氨酰胺转胺酶前导肽C端α-螺旋37-42(QPGNSL)分别置换成3个丙氨酸或3个甘氨酸。
3.构建权利要求1所述谷氨酰胺转胺酶突变体的方法,是通过定点突变技术将吸水链霉菌pro-TGase前导肽C端α-螺旋37-42中的6个氨基酸(QPGNSL)分别置换成3个丙氨酸或3个甘氨酸。
4.根据权利要求3所述的构建方法,包括以下步骤:以含有编码pro-TGase的基因的质粒为模板利用定点突变技术,将pro-TGase前导肽C端α-螺旋37-42中的6个氨基酸(QPGNSL)分别置换成3个丙氨酸或3个甘氨酸;将含有突变体基因的表达载体测序验证后,转化表达宿主E.coli BL21。
5.含有编码权利要求1所述突变体的DNA序列的基因工程菌或转基因细胞系。
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