[发明专利]一种不含明胶的风疹疫苗冻干配方及工艺

说明书

技术领域

本发明涉及风疹疫苗的冻干配方及工艺，具体而言是一种无明胶的新型配方和工艺。

背景技术

众所周知，疫苗是现代社会一种高效安全的免疫手段，因而疫苗其本身的安全可靠性一直被广泛关注。

而在疫苗的发展史上，明胶作为保护剂被广泛应用。但随着科学技术的不断进步，明胶作为冻干保护剂的弊端也逐渐显现出来。明胶是人用疫苗常用的一种保护剂和赋形剂，来源于动物，其生产过程无法完全控制所有病毒的污染，而且明胶与疫苗接种后过敏反应有关。WHO在多次疫苗生产相关指南上建议全球疫苗生产企业，尽可能采用明胶替代物作为疫苗的冻干赋形剂。

目前已有很多明胶替代保护剂被开发出来，虽然这些新产品降低了对人体过敏的风险，但是对疫苗的保护作用不如含有明胶的保护剂。使得疫苗在冻干、储存过程中的稳定性下降，容易失效。所以一种低风险、高稳定性的冻干保护的研发成为当务之急。

发明内容

本发明的目的是通过一种新型的冻干配方及工艺，来制备一种无明胶的风疹疫苗，由本发明制备的疫苗配方中采用明胶替代物，在保证疫苗免疫效力的同时，能够保证安全可靠。经测定，由本发明所制备的风疹疫苗冻干成品复溶前没有塌陷、变色萎缩现象，且均为乳酪色疏松体；复溶后表现为橘红色澄明液体，无异物。当时滴度测定不低于5.0 lgCCID₅₀/mL，4 ℃避光保存3个月滴度不低于4.9 lgCCID₅₀/mL。由本发明冻干工艺制备的疫苗水分含量在2％以下。

本发明中的冻干配方不添加明胶，通过优化冻干条件，调整配方中成分类别及比例，解决了无明胶冻干保护剂难赋性的难点保证了对疫苗的保护作用，使其在冻干、储存、运输过程中不易丧失效力。

为实现上述目的，本发明的主要步骤有以下几个部分：

1、   按照常规方法制备风疹病毒原液；

2、  将风疹病毒原液与保护剂按照一定比例混合，制成冻干半成品；

3、  将疫苗半成品按0.5mL/支分装，按照一定程序冻干，制成疫苗成品。

 进一步设置在以上步骤2中，对风疹病毒原液滴度要求不低于5.0 lgCCID₅₀/mL，以保证本疫苗的效力。

 进一步设置在以上步骤2中，疫苗冻干半成品含有60％（V/V）风疹病毒收获液，20-60 g/L甘露醇，20-60 g/L右旋糖酐，8-16 g/L谷氨酸钠，2-10 g/L尿素，1-7 g/L盐酸精氨酸，0.5-1.5 g/L人血白蛋白。

进一步设置以上步骤2中，人血白蛋白在疫苗冻干半成品中的终浓度为0.8-1.2 g/L。

进一步设置以上步骤3中，具体的冻干工艺程序是：

预冻：第一阶段常压降温至-45℃并维持 6h，第二阶段常压退火至-30℃ 需13h；       

主干燥：阶段式升温速率2.5℃/h，需25h；

二次干燥：升温速率1.8℃/h，需13h。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行具体的描述，只用于对本发明进行进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限定。

【实施例1】

 取风疹病毒收获液496ml，滴度为5.50 lgCCID₅₀/mL，按下列描述向其中添加各成分。

添加浓度为30％（W/V）甘露醇83ml，使得在疫苗冻干半成品中浓度为30 g/L。

添加浓度为15％（W/V）右旋糖酐166ml，使得在疫苗冻干半成品中浓度为30 g/L。

添加浓度为60％ （W/V）谷氨酸钠20.75ml，使得在疫苗冻干半成品中浓度为15 g/L。

添加浓度为16％（W/V）尿素20.75ml，使得在疫苗冻干半成品中浓度为4 g/L。

添加浓度为4％（W/V）盐酸精氨酸41.5ml，使得在疫苗冻干半成品中浓度为2 g/L。

添加浓度为20％（W/V）人血白蛋白2.0ml，使得在疫苗冻干半成品中浓度为1 g/L。

制备得到疫苗半成品830ml。

按照0.5mL/支进行分装进西林瓶中，分装1537支，按照以下程序进行冻干。

预冻：第一阶段常压降温至-45℃并维持 6h，第二阶段常压退火至-30℃ 需13h；       

主干燥：阶段式升温速率2.5℃/h，需25h；

二次干燥：升温速率1.8℃/h，需13h。