[发明专利]一种制备利拉鲁肽的方法

权利要求书

1.一种利拉鲁肽的合成方法，所述方法步骤如下：

步骤1，通过液相方法合成赖氨酸三肽片段Fmoc-Lys-(Glu(N^α-Palmitoyl)-OtBu)-OH；

步骤2，在活化剂系统的存在下，由树脂固相载体和Fmoc-Gly-OH偶联得到Fmoc-Gly-树脂；

步骤3，通过固相合成法，按照利拉鲁肽主链肽序依次偶联具有N端Fmoc保护且侧链保护的氨基酸，其中赖氨酸三肽片段采用Fmoc-Lys-(Glu(N^α-Palmitoyl)-OtBu)-OH； 

步骤4，裂解，纯化，冻干，得到利拉鲁肽。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征是：

其中，步骤1所述的固相合成方法，所述片段Fmoc-Lys-(Glu(N^α-Palmitoyl)-OtBu)-OH的液相合成为：正十六烷酸、HOSu和DCC偶联得到Palmitoyl-OSu，然后Palmitoyl-OSu和H-Glu-OtBu反应得到二肽片段Palmitoyl-Glu-OtBu；Palmitoyl-Glu-OtBu、HOSu和DCC偶联得到Palmitoyl-Glu(OSu)-OtBu，然后Palmitoyl-Glu(OSu)-OtBu和Fmoc-Lys-OH反应得到赖氨酸三肽片段Fmoc-Lys-(Glu(N^α-Palmitoyl)-OtBu)-OH。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征是：

其中，步骤2所述的固相合成方法，所述树脂固体载体采用2-CTC树脂，所述活化剂系统选自DIEA、TMP或NMM，所述Fmoc-Gly-树脂为0.10~0.35mmol/g取代度的Fmoc-Gly-CTC树脂。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征是：

其中，步骤2所述的固相合成方法，所述树脂固体载体采用王树脂，所述活化剂系统由DIC、HOBt和DMAP组成，所述Fmoc-Gly-王树脂为0.10~0.35mmol/g取代度的Fmoc-Gly-王树脂。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征是：

其中，步骤3所述的固相合成方法，1）采用由体积比为1:4的哌啶和DMF组成的去保护液脱除Fmoc-Gly-树脂上的Fmoc保护基，得到H-Gly-树脂；

2）在偶联剂系统的存在下，H-Gly-树脂和Fmoc保护且侧链保护的精氨酸偶联得到Fmoc-Arg(Pbf)-Gly-树脂；

3）重复步骤1）、2），按照利拉鲁肽主链肽序依次进行氨基酸的偶联，其中赖氨酸三肽片段采用Fmoc-Lys-(Glu(N^α-Palmitoyl)-OtBu)-OH。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征是：

所述偶联剂系统包括缩合剂和反应溶剂，所述缩合剂选自DIC/HOBt、PyBOP/HOBt/DIEA或HATU/HOBt/DIEA；所述反应溶剂选自DMF、DCM、NMP、DMSO或他们之间的任意组合。