[发明专利]一种黄曲霉毒素的测定方法

权利要求书

1.一种黄曲霉毒素的测定方法，包括样品提取、标准溶液测定和样品测定步骤，其特征在于：所述样品提取步骤采用乙腈-水的提取液提取，其中乙腈和水的体积比为84:16；所述标准溶液测定步骤中取黄曲霉毒素B₁、G₁标准储备液用乙腈定容，制备标准系列溶液，处理后利用液相色谱仪进行测定；所述样品检测采用高效液相色谱法，利用多功能净化柱检测样品中的黄曲霉毒素。

2.根据权利要求1所述的一种黄曲霉毒素的测定方法，其特征在于：所述样品提取步骤具体为称取样品10g，精确至0.0001g，加入乙腈-水的提取液搅拌30分钟，其中乙腈和水的体积比为84:16，然后用定性滤纸过滤。

3.根据权利要求1所述的一种黄曲霉毒素的测定方法，其特征在于：所述标准溶液测定步骤具体为取黄曲霉毒素B₁、G₁标准储备液10μg/mL，用乙腈定容至5mL，混匀，2～8℃保存三个月；使用时乙腈配成0.025μg/mL、0.05μg/mL、0.1μg/mL、0.15μg/mL、0.2μg/mL、0.25μg/mL系列标准溶液，吸取标准系列溶液各200μL，在60℃水浴下氮气吹干，加200mL正己烷和100mL三氯乙酸混匀，30s后于40℃烘箱衍生15min，室温下放入干燥器中1min后以200uL水-乙腈溶解，混匀后全部进自动进样瓶中，利用液相色谱仪进行测定。

4.根据权利要求1所述的一种黄曲霉毒素的测定方法，其特征在于：所述样品测定步骤采用高效液相色谱法检测样品中的黄曲霉毒素；

色谱条件：色谱柱：Agilent SB C-18（25cm×4.6mm）；流动相：体积百分比为85%的乙腈和15%的水；柱温：30℃，进样量：25μL；流速：1.0mL/min，荧光检测器：激发波长：360nm，发射波长：440nm；

取8mL提取过滤液至Mycosep^TM228多功能净化柱，净化柱的收集池内转移2mL净化液到衍生瓶中，60℃下氮吹后，加200mL正己烷和100mL三氯乙酸混匀，30s后于40℃烘箱衍生15min，室温下放入干燥器中1min后以200μL水-乙腈溶解，混匀后全部进自动进样瓶中，利用液相色谱仪进行测定。

5.根据权利要求1所述的一种黄曲霉毒素的测定方法，其特征在于：黄曲霉毒素的含量通过如下方法计算：黄曲霉毒素按照G₁、B₁ 的顺序出峰，以标准系列的峰面积对浓度分别绘制每种黄曲霉毒素的标准曲线，标准曲线的相关系数r大于0.995，试样通过与标准色谱图保留时间的比较确定每一种黄曲霉毒素的峰，根据每种黄曲霉毒素的标准曲线及试样中的峰面积计算试样中各种黄曲霉毒素含量：

其中：X——试样中每种黄曲霉毒素含量，单位为μg/kg；

A——试样按外标法在标准曲线中对应的浓度，单位为μg/mL；

V——试样提取过程中提取液的体积，单位为mL；

m——试样的取样量，单位为g；

f——浓缩倍数。

6.根据权利要求1所述的一种黄曲霉毒素的测定方法，其特征在于：所述步骤（1）中多功能净化柱为Mycosep^TM228多功能净化柱。