[发明专利]与用于使肿瘤靶向成像的化合物缀合的氨基酸连接基的合成和组合物

说明书

本发明涉及用作近红外荧光探针的化合物，其中该化合物包括：i)结合靶受体蛋白的蝶酰基配体；ii)染料分子；和iii)含有氨基酸或其衍生物的连接分子。本发明还描述了制备和使用所述化合物的方法和组合物、掺入所述化合物的方法和掺入所述化合物的试剂盒。

相关申请

本专利申请涉及并要求2013年3月15日提交的美国临时专利申请 顺序号US 61/791,921的优先权利益，将该文献内容完整地引入本申请 作参考。

技术领域

本申请属于诊断领域。本申请提供合成和使用氨基酸连接基的方 法，所述氨基酸连接基与用于使肿瘤靶向成像的化合物缀合。缀合氨基 酸连接基增加了所述化合物的特异性和检测性。关注在诊断成像中应用 的方法和组合物。

背景技术

手术除去恶性肿瘤疾病构成了用于癌症初步治疗的最常用和有效 的治疗手段之一。所有可检测到的恶性肿瘤损害的切除导致所有癌症患 者的约50％中未可检测到该病复发¹，且可能延长预期寿命或减少观察到 癌症复发的患者的发病率。并不两人惊奇地，用于实现更定量的缩减细 胞的手术方法是目前正在接受的更多的考察。

所有可检测到的恶性肿瘤损害的切除导致所有癌症患者的约50％中 未可检测到该病复发，且可能延长预期寿命或减少观察到癌症复发的患 者的发病率。由于完全切除恶性肿瘤损害的重要性，所以有益的是确保 精确和完全地鉴定恶性肿瘤损害。在手术过程中鉴定恶性肿瘤损害目前 通过三种方法进行。首先，可以基于异常颜色、质地和/或形态通过视觉 检测许多肿瘤块和根瘤。因此，肿瘤块可以显示出斑驳的颜色，出现具 有不规则边界的不对称性或从健康器官的轮廓中突出。恶性肿瘤块还可 以因柔软性、弹性或坚硬度而通过触觉与相邻的健康组织识别。最终， 可以使用荧光染料在手术过程中定位几种癌症病灶，所述荧光染料从原 发性肿瘤被动地流入引流的淋巴结。在这种后面的方法中，可以通过视 觉鉴定荧光(标记)淋巴结，切除并且检查癌细胞是否转移至这些淋巴结。

尽管认识到除去肿瘤的重要性和一些鉴定技术在使肿瘤块显影的 可利用性，但是许多恶性肿瘤根瘤仍然逃过了检测，导致疾病复发且通 常导致死亡。因此，对改进的肿瘤鉴定存在需求。这种动机已经导致引 入了用于手术中使恶性肿瘤疾病显影的两种新方法。在第一种方法中， 将猝灭的荧光染料通过全身注入具有肿瘤的动物，且通过肿瘤特异性酶、 pH改变或氧化还原电位改变释放猝灭部分被利用于选择性地活化恶性肿 瘤块内的荧光。在第二种方法中，使荧光染料于肿瘤特异性靶向配体缀 合，所述肿瘤特异性靶向配体导致结合的染料蓄积在超表达所述配体的 受体的癌症中。用于这种后面的目的的肿瘤靶向配体的实例包括叶酸， 其显示对卵巢、肾、肺、子宫内膜、乳腺和结肠和DUPA的叶酸受体(FR) 阳性癌症的特异性，其可以将连接的荧光染料选择性地递送至表达前列 腺特异性膜抗原(PSMA)的细胞，即前列腺癌和其它实体瘤的新血管系统。 有益地，近期已经在人卵巢癌患者中测试了一种叶酸靶向的荧光染料(叶 酸-荧光素或EC17)。在该研究中，借助于肿瘤靶向荧光染料除去了超过 不使用它的恶性肿瘤损害～5X以上，且所有切除的荧光损害均通过药理 学方法被证实为恶性肿瘤。

常规的荧光技术使用在可见光光谱(～400-600nm)内的探针，它对 于手术过程中影像指导外科手术而言并非最佳，因为它与因组织中胶原 蛋白导致的相对高水平的非特异性背景光相关。因此，来自这些常规化 合物的信躁比低。此外，由生物发色团、特别是血红蛋白吸收可见光将 透入深度限于几个毫米。因此，埋藏组织中深于几个毫米的肿瘤可能仍 然无法检测到。此外，荧光素的电离平衡(pKa＝6.4)导致在5-9范围的 pH-依赖性吸收和发射。因此，基于荧光素的染料的荧光在低pH(低于pH 5)下被猝灭。