[发明专利]用于透化固定的血细胞的组合物及其用途有效
申请号: | 201380073830.0 | 申请日: | 2013-12-23 |
公开(公告)号: | CN105074418B | 公开(公告)日: | 2019-01-15 |
发明(设计)人: | 安德烈亚斯·凡·阿格索文 | 申请(专利权)人: | 贝克曼考尔特公司 |
主分类号: | G01N1/30 | 分类号: | G01N1/30;G01N33/53;G01N33/569 |
代理公司: | 上海市华诚律师事务所 31210 | 代理人: | 汤国华 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 固定 血细胞 组合 及其 用途 | ||
1.一种用于透化固定的白细胞的细胞处理组合物,其包含下列成分的水溶液:
(a)至少一种阴离子表面活性剂,其以0.3%至2%(w/v)之间的浓度被包含在所述组合物中,其中所述阴离子表面活性剂的盐如式(1)所示:
Y—SO3-X+ (1)
其中,Y为R--O或R中的一种,R代表具有8至18个碳原子的烷基、亚烷基、芳基、亚烷基-烷基、芳基-烷基或芳基-亚烷基,X代表一价阳离子,和
(b)血清白蛋白,其以0.2%至20%(w/v)之间的浓度被包含在所述组合物中,
其中所述细胞处理组合物的pH在2至6之间。
2.如权利要求1所述的细胞处理组合物,其中所述阴离子表面活性剂以0.6%至1.5%(w/v)之间的浓度被包含在所述组合物中。
3.如权利要求1所述的细胞处理组合物,其中所述阴离子表面活性剂为十二烷基硫酸钠(SDS)或十二烷基苯磺酸钠(SDBS)。
4.如权利要求1所述的细胞处理组合物,其中所述血清白蛋白为哺乳动物的血清白蛋白。
5.如权利要求1所述的细胞处理组合物,其中所述血清白蛋白为牛血清白蛋白。
6.如权利要求1所述的细胞处理组合物,其中所述细胞处理组合物的pH在3至5.5之间。
7.如权利要求1所述的细胞处理组合物,进一步包含离液序列高的盐。
8.如权利要求7所述的细胞处理组合物,其中所述组合物包含浓度为20至250mM的离液序列高的盐。
9.如权利要求7所述的细胞处理组合物,其中所述离液序列高的盐包含高氯酸盐、硫氰酸盐、或它们的组合。
10.一种包含如权利要求1所述的细胞处理组合物和含有固定的白细胞的生物样品的组合,其中所述组合的pH值在5.5和7之间。
11.如权利要求10所述的组合,所述生物样品包含全血、骨髓、或分离的白细胞的亚群。
12.如权利要求10所述的组合,所述白细胞包含淋巴细胞或单核细胞。
13.一种用于处理分离的生物样品的方法,所述样品包含至少白细胞,所述方法包含下列步骤:
(a)固定步骤,其包含使所述生物样品与固定剂接触,其中加入足量的所述固定剂以实现蛋白质、脂蛋白和核酸分子的至少部分交联;以及
(b)透化步骤,其包含使所述固定的生物样品与权利要求1所述的细胞处理组合物相接触。
14.如权利要求13所述的方法,进一步包含:
(c)标记步骤,其包含使所述经透化的生物样品与至少一种对细胞内和/或细胞外表位具有特异性的可检测地被标记的结合剂相接触。
15.如权利要求13所述的方法,其中所述方法包括将所述生物样品与所述固定剂在15℃至30℃的温度之间温育5至15分钟。
16.如权利要求13所述的方法,其中所述方法包括将所述固定的生物样品与所述细胞处理组合物在20℃至50℃的温度之间温育2至10分钟。
17.如权利要求13所述的方法,其中所述方法包括清洗所述透化的生物样品。
18.如权利要求13所述的方法,其中所述细胞处理组合物透化所述白细胞和暴露所述白细胞的细胞内表位。
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