[发明专利]纤维二糖水解酶的变体

权利要求书

1.一种分离的亲本纤维二糖水解酶(CBH)变体，其中所述变体具有纤维素酶活性，与SEQ ID NO:3具有至少80％的序列同一性，并且在磷酸溶胀纤维素(PASC)测定中具有显著改进的性能。

2.根据权利要求1所述的分离的变体，其中所述变体包含氨基酸置换，所述氨基酸置换选自由以下各项组成的组：Y247D、N49P、T246V、N200G和其组合，其中每种氨基酸置换的位置对应于SEQ ID NO:3。

3.根据权利要求2所述的分离的变体，其中所述变体包含Y247D置换。

4.根据权利要求2或3所述的分离的变体，其中所述变体包含N49P置换。

5.根据权利要求2、3或4所述的分离的变体，其中所述变体包含T246V置换。

6.根据权利要求2、3、4或5所述的分离的变体，其中所述变体包含N200G置换。

7.根据权利要求2、3、4或6所述的分离的变体，其中所述变体进一步包含氨基酸置换，所述氨基酸置换选自由以下各项组成的组：T246S和T246P。

8.根据权利要求2、3、4、5或7所述的分离的变体，其中所述变体进一步包含N200R氨基酸置换。

9.根据权利要求2至8中任一项所述的分离的变体，其中所述变体进一步包含氨基酸置换，所述氨基酸置换选自由以下各项组成的组：F418M、T255D或T255I或T255K或T255P或T255R或T255V、D241N、G234D、P194V、T356L、S92T、T41I和其组合。

10.根据前述权利要求中任一项所述的分离的变体，其中所述亲本CBH多肽为真菌纤维二糖水解酶1(CBH1)。

11.根据权利要求10所述的分离的变体，其中所述真菌CBH1是来自红褐肉座菌(Hypocrea jecorina)、施韦尼兹肉座菌(Hypocrea schweinitzii)、东方肉座菌(Hypocrea orientalis)、拟康氏木霉(Trichoderma pseudokoningii)、康长木霉(Trichoderma konilangbra)、桔绿木霉(Trichoderma citrinoviride)、哈茨木霉(Trichoderma harzanium)、棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus)、黑曲霉(Aspergillus niger)、微紫青霉菌(Penicillium janthinellum)、灰腐质霉(Humicola grisea)、嗜热色串孢(Scytalidium thermophilum)或柄孢霉(Podosporaanderina)。

12.根据前述权利要求中任一项所述的分离的变体，其中所述亲本CBH多肽与SEQ ID NO:3具有至少90％的序列同一性。

13.一种分离的多核苷酸，其包含编码根据前述权利要求中任一项所述的亲本CBH多肽变体的多核苷酸序列。

14.一种载体，其包含根据权利要求13所述的分离的多核苷酸。

15.根据权利要求14所述的载体，其中所述载体为表达载体。

16.一种宿主细胞，其包含根据权利要求13所述的分离的多核苷酸、根据权利要求14所述的载体或根据权利要求15所述的表达载体。

17.根据权利要求16所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞为真菌细胞或细菌细胞。