[发明专利]免疫原性组合物

说明书

技术领域

本发明涉及包含艰难梭状芽孢杆菌(Clostridium difficile，C. difficile)多肽和不含铝的佐剂的免疫原性组合物。本发明还涉及疫苗组合物，以及本发明的疫苗和免疫原性组合物在预防或治疗或制备药物中的用途。

背景

艰难梭状芽孢杆菌是医院肠道感染的最重要原因并且是人中假膜性结肠炎的主要原因(Bartlett等人Am. J. Clin. Nutr. 11 suppl: 2521-6 (1980))。感染艰难梭状芽孢杆菌的个体的总体相关死亡率在诊断的3个月内计算为5.99%，并且更高的死亡率与高龄相关，在超过80岁的患者中为13.5% (Karas等人 Journal of Infection 561:1-9 (2010))。目前对艰难梭状芽孢杆菌感染的治疗是施用抗生素 (甲硝唑和万古霉素) ，然而，已经存在对这些抗生素具有抗性的菌株的证据(Shah等人., Expert Rev. Anti Infect. Ther. 8(5), 555–564 (2010))。因此，存在对能够诱发针对艰难梭状芽孢杆菌的抗体和/或保护性免疫应答的免疫原性组合物的需求。

艰难梭状芽孢杆菌的肠毒性主要由于毒素A(“ToxA”)和毒素B(“ToxB”)两种毒素的作用。毒素A和毒素B的C端结构域包含重复单位，例如毒素A的C端结构域由连续的重复单位构成(Dove等人Infect. Immun. 58:480-499 (1990))。由于这一原因，C端结构域也可以称为“重复结构域”。如Ho等人 (PNAS 102:18373-18378 (2005))中描述，这些重复部分可以进一步分为短重复(SRs)和长重复(LRs)。

已经描述了包含来自艰难梭状芽孢杆菌的抗原的免疫原性组合物。WO96/12802和WO00/61762和Lyerly等人 (Current Microbiology 21:29-32 (1990))涉及毒素A的片段，特别是C端结构域的片段，其用于诱导仓鼠中的保护性免疫应答。WO9920304涉及通过在甲醛中孵育灭活的共同纯化的毒素A和毒素B的混合物。WO00/61762涉及包含艰难梭状芽孢杆菌的毒素A和毒素B的全长C端结构域或C端结构域的片段的免疫原性组合物。类似地，WO2012/163817、WO2012/163811和WO2012/163810提供毒素A和毒素B的可能的片段以及其融合蛋白的公开内容。

需要具有改进的免疫原性的新组合物或疫苗。作为一种策略，已经用佐剂尝试和改进针对任何给定抗原产生的免疫应答。例如，WO2009035707描述了包含艰难梭状芽孢杆菌毒素A和B的类毒素以及佐剂诸如氢氧化铝化合物的组合物。

以前已经公开了含有脂多糖和皂树(Quillaja)皂苷的组合的佐剂，例如，在EP0671948中。水包油乳剂自身在本领域众所周知，已表明可用作佐剂组合物(EP 399843; WO 95/17210)。

仍然需要提供针对艰难梭状芽孢杆菌的合适的免疫应答的疫苗和免疫原性组合物。

概述

在一个方面，本发明涉及包含多肽和佐剂的免疫原性组合物，所述多肽包含艰难梭状芽孢杆菌(C. difficile)毒素A片段和/或艰难梭状芽孢杆菌毒素B片段，且所述佐剂包含以脂质体的形式呈现的免疫活性皂苷级分。免疫学活性皂苷级分可以是QS21，且脂多糖可以是3D-MPL。合适地，免疫原性组合物可以包含约50 μg 3D-MPL和约50 μg QS21。

在一个方面，本发明涉及包含多肽和佐剂的免疫原性组合物，所述多肽包含艰难梭状芽孢杆菌毒素A片段和/或艰难梭状芽孢杆菌毒素B片段，且所述佐剂包含水包油乳剂，其中所述水包油乳剂包含可代谢油、母育酚和乳化剂。可代谢油可以以约5.35 mg的量存在。母育酚可以以约5.94 mg的量存在。合适地，乳化剂可以以约2.425 mg的量存在。合适地，可代谢油是角鲨烯，母育酚是α-生育酚，且乳化剂是聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。

合适地，根据本发明的任何方面的免疫原性组合物包含艰难梭状芽孢杆菌毒素A重复结构域片段和艰难梭状芽孢杆菌毒素B重复结构域片段，且引发中和毒素A和毒素B的抗体。在本发明的进一步实施方案中，免疫原性组合物包含艰难梭状芽孢杆菌毒素A片段和艰难梭状芽孢杆菌毒素B片段，其中所述片段中的一种是N端片段，而另一种是重复结构域片段。