[发明专利]用于预测对错配的人白细胞抗原的免疫应答的方法

说明书

技术领域

本发明涉及用于预测移植之后对人白细胞抗原(HLA)的免疫应答的方法，所述方法包括使供体和/或供体材料和受体HLA分型以测定HLA错配以及测定预测的间接识别的HLA抗原决定部位(PIRCHES)的数量。所以本发明提供了用于选择和/或筛选异源移植用供体材料的方法，例如从错配的，优选非亲缘供体中选择具有可容许的错配的供体材料的方法。在优选的实施方式中，该方法涉及移植前预测可在移植异源的干细胞、不同来源的造血干细胞、脐带血、肾和/或其他细胞、组织或器官之后出现的不想要的同种异体反应性。

背景技术

异源细胞、组织和器官的移植是一种进化疗法。其逐渐成为有吸引力的治疗选择。预期在不久的将来，接收来自非亲缘供体移植物的患者数量将翻番。移植之后的同种异体反应性对临床结果具有大的影响，具有病理学以及有益的作用。已知HLA错配诱导移植之后的免疫反应，但是不十分了解与预测不想要的免疫反应的风险相关的因素。

造血干细胞移植

造血干细胞移植(HSCT)是快速生长治疗选择的一个例子。HSCT的主要限制因素仍是移植物抗宿主疾病(GVHD)，和因为预期接收HSCT的患者数量将增加，必须加速提供预防GVHD的方法。为了克服GVHD的风险，患者优选地用所有HLA-等位基因完全匹配的供体移植。但是，由于群体中HLA分子的多样性，这些完全匹配的供体对于约40％的患者不可用。当完全匹配的供体不可用时，临床医生通常必须面对决定从错配的供体中选择最佳供体(即携带最低GVHD风险的供体)的困难。直到现在，测定哪个供体最合适，依赖于需要多达14天实验室工作的费劲试验。

历史上，认为HSCT之后的同种异体反应性主要由于供体T细胞直接识别HLA差异而诱发。这意味着移植物T细胞识别作为完整的分子在宿主细胞的细胞表面上表达的错配的HLA。本发明尤其基于间接识别。当源自错配的宿主HLA等位基因的肽被加工和呈现在共享的HLA并且从而被供体T细胞识别时，可诱发同种异体反应性。

造血干细胞移植(HSCT)之后的同种异体反应性对于临床结果有大的影响，具有病理学以及有益的作用。同种异体反应性的病理学作用反映在移植物抗宿主病(GVHD)。急性GVHD(aGVHD)的风险取决于HLA-A、-B、-C、-DRB1和-DQB1等位基因的错配水平，最佳匹配是五个基因座的完全匹配(10/10匹配)。

与单个错配的供体的受体相比，匹配的非亲缘HSCT的受体的严重aGVHD累积发生率减少24％(参考文献1a)。尽管当与具有一个HLA-C等位基因错配的供体的HSCT相比时，10/10匹配HSCT的受体增加白血病复发的风险比(HR)为47％(参考文献2a)，但是移植方案优选选择10/10匹配供体，因为部分匹配的非亲缘供体中的总体存活率显著更差(参考文献1a)。但是，完全匹配的非亲缘供体并不是对所有的患者可用；在40％的情况下，单个HLA错配的供体(9/10匹配)是最佳可用的可选方案(参考文献3a)。

在这些情况下，限定最佳-容许的错配可有助于防止GVHD以及随后更差的结果。最近，基于流行病学鉴定了某些特异性非容许的错配，与增加的形成严重aGVHD的风险相关(参考文献4a)。具有这些非容许错配的HSCT之后，增加GVHD风险的机理仍不清楚。

功能上，用细胞毒素T-淋巴细胞前体频率(CTLpf)试验测定更好-容许的错配。大于1/10⁵的CTLpf预测为形成严重的aGVHD(参考文献5a)。而且，小于或等于1/10⁶PBL的CTLpf与更好的总体存活率相关(参考文献：Heemskerk等(2007)骨髓移植(Bone Marrow移植)，40，193-200)。因此，这些标准可用于区分潜在错配的供体。但是，CTLpf试验是费力的、延误移植的时间，所以在大部分移植中心不使用。另外，来自潜在供体的材料在用于移植之前需要被运输和测试。目前没有有效的方式可用来基于消除可能产生不利结果的样品，进行递送前直接供体选择。