[发明专利]植物中内源基因的转录基因沉默无效
申请号: | 201380058018.0 | 申请日: | 2013-08-27 |
公开(公告)号: | CN104781407A | 公开(公告)日: | 2015-07-15 |
发明(设计)人: | N-H·蔡;S·邓;H·代;Q-W·牛;H·王;C·阿雷纳斯维尔特罗 | 申请(专利权)人: | 洛克菲勒大学 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C12N5/04;C12Q1/68 |
代理公司: | 永新专利商标代理有限公司 72002 | 代理人: | 左路 |
地址: | 美国*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 植物 内源 基因 转录 沉默 | ||
1.一种核酸构建体,其包含可操作地连接至核酸沉默物分子的植物可操作启动子,所述核酸沉默物分子可操作地连接至植物可操作的3’调节区,其中所述核酸沉默物分子包含至少一个植物内源基因靶标的启动子区,其中在转基因植物中表达所述核酸沉默物分子导致所述植物内源基因靶标的转录基因沉默。
2.权利要求1的核酸构建体,其中所述至少一个启动子区为启动子区的单拷贝。
3.权利要求1的构建体,其中所述核酸沉默物分子相对于所述植物可操作启动子处于正义方向。
4.权利要求3的构建体,其中所述核酸沉默物分子的转录产生单链正义沉默物。
5.权利要求1的构建体,其中所述核酸沉默物分子相对于所述植物可操作启动子处于反义方向。
6.权利要求5的构建体,其中所述核酸沉默物分子的转录产生单链反义沉默物。
7.权利要求1的构建体,其中所述核酸沉默物分子以反向重复构型提供。
8.权利要求7的构建体,其中所述反向重复核酸沉默物分子的转录产生双链沉默物。
9.权利要求7的构建体,其中所述核酸构建体在所述反向重复沉默物区之间额外地包含间隔序列。
10.权利要求1-9中任一项的构建体,其中所述植物可操作启动子为单启动子、双同源启动子或双异源启动子。
11.权利要求1-10中任一项的构建体,其中所述3’调节区为3’病毒序列。
12.权利要求1-11中任一项的构建体,其中所述3’调节区为polyA添加序列。
13.权利要求1-12中任一项的构建体,其中所述启动子区包含所述内源基因的约300个连续核苷酸-约1500个连续核苷酸,所述内源基因的约400个连续核苷酸-约1200个连续核苷酸,所述内源基因的约425个连续核苷酸-约1100个连续核苷酸或者所述内源基因的约425个连续核苷酸-约1075个连续核苷酸。
14.权利要求13的构建体,其中所述启动子区包含选自SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4的核苷酸序列。
15.一种核酸构建体,其包含可操作地连接至核酸沉默物分子的植物可操作启动子,所述核酸沉默物分子可操作地连接至植物可操作的3’调节区,其中所述核酸沉默物分子包含至少一个植物内源基因靶标的启动子区,其中所述至少一个启动子区不以反向重复的形式存在,并且其中在转基因植物中表达所述核酸沉默物分子导致所述植物内源基因靶标的转录基因沉默。
16.权利要求15的核酸构建体,其中所述至少一个启动子区为启动子区的单拷贝。
17.权利要求15的构建体,其中所述核酸沉默物分子的启动子区相对于所述植物可操作启动子处于正义方向。
18.权利要求17的构建体,其中所述核酸沉默物分子的启动子区的转录产生单链正义沉默物。
19.权利要求17的构建体,其中所述核酸沉默物分子相对于所述植物可操作启动子处于反义方向。
20.权利要求19的构建体,其中所述核酸沉默物分子的转录产生单链反义沉默物。
21.权利要求15-20中任一项的构建体,其中所述植物可操作启动子为单启动子、双同源启动子或双异源启动子。
22.权利要求15-21中任一项的构建体,其中所述3’调节区为3’病毒序列。
23.权利要求15-22中任一项的构建体,其中所述3’调节区为polyA添加序列。
24.权利要求15-23中任一项的构建体,其中所述启动子区包含所述内源基因的约300个连续核苷酸-约1500个连续核苷酸,所述内源基因的约400个连续核苷酸-约1200个连续核苷酸,所述内源基因的约425个连续核苷酸-约1100个连续核苷酸或者所述内源基因的约425个连续核苷酸-约1075个连续核苷酸。
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