[发明专利]装载了肿瘤裂解物的微粒

权利要求书

1.一种分离的树突状细胞，其包含由(i)酵母细胞壁微粒和(ii)酵母细胞壁微粒内装载的肿瘤裂解物组成的吞噬组分，其中装载的酵母细胞壁微粒通过冻干所述肿瘤裂解物和所述酵母细胞壁微粒的组合以捕获所述肿瘤裂解物来获得，其中200μg至500μg的肿瘤裂解物存在于10⁹个酵母细胞壁颗粒中。

2.权利要求1的树突状细胞，其中所述肿瘤裂解物是选自癌症的裂解物，所述癌症选自下组：乳腺癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、神经胶质瘤、髓母细胞瘤、神经母细胞瘤、肾母细胞瘤、横纹肌肉瘤、骨肉瘤、肝癌、胰腺癌、黑色素瘤、前列腺癌和眼黑色素瘤。

3.权利要求1的树突状细胞，其中所述树突状细胞是在接触装载了肿瘤裂解物的酵母细胞壁微粒之前已分离不超过8天的未成熟细胞。

4.一种疫苗，其包含权利要求1的分离的树突状细胞。

5.一种用于生产包含装载了肿瘤裂解物的酵母细胞壁微粒的分离的树突状细胞的方法，其包括：

(i)将所述肿瘤裂解物装载入所述酵母细胞壁微粒来产生装载了肿瘤裂解物的酵母细胞壁微粒；

(ii)冻干所述装载了肿瘤裂解物的酵母细胞壁微粒以捕获所述肿瘤裂解物；以及

(iii)将所述装载了肿瘤裂解物的酵母细胞壁微粒与树突状细胞共同孵育，

其中所述孵育引起所述树突状细胞吞噬所述装载了肿瘤裂解物的微粒，

其中200μg至500μg的肿瘤裂解物存在于10⁹个酵母细胞壁颗粒中。

6.权利要求5的方法，其进一步包括：(a)在溶液中重悬所述装载了肿瘤裂解物的酵母细胞壁微粒以及(b)在步骤(iii)之前并在步骤(ii)之后冻干所述重悬溶液。

7.权利要求5的方法，其中所述肿瘤裂解物通过冷冻和融化肿瘤生成。

8.权利要求7的方法，其进一步包括重复所述冷冻和融化步骤。

9.权利要求8的方法，其进一步包括在-150℃冷冻保存所述肿瘤裂解物。

10.权利要求5的方法，其中所述步骤(iii)包括：

(a)将肿瘤裂解物加入酵母细胞壁微粒，(b)孵育所述酵母细胞壁微粒，(c)冻干所述酵母细胞壁微粒以及(d)洗涤所述酵母细胞壁微粒，其中重复步骤(b)-(c)至少一次且在重复步骤(b)之前伴随将水加入所述酵母细胞微粒的步骤。

11.权利要求5的方法，其中步骤(iii)包括：

(a)将装载了肿瘤裂解物的微粒与树突状细胞以约100:1的比例接触，(b)将所述装载了肿瘤裂解物的微粒与所述树突状细胞孵育1至2小时，以及(c)收集所述树突状细胞并洗涤所述细胞。

12.权利要求1的分离的树突状细胞在制备用于治疗癌症的疫苗中的用途。

13.权利要求12的用途，其中所述癌症选自下组：乳腺癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、神经胶质瘤、髓母细胞瘤、神经母细胞瘤、肾母细胞瘤、横纹肌肉瘤、骨肉瘤、肝癌、胰腺癌、黑色素瘤、前列腺癌和眼黑色素瘤。