[发明专利]使用大豆磷脂酰丝氨酸制备的脂质卷

说明书

未纯化的或低纯的大豆磷脂酰丝氨酸用于制备脂质卷。所述脂质卷含有约40‑74%大豆磷脂酰丝氨酸、多价阳离子和生物活性剂。一种优选的脂质卷含有抗真菌药物两性霉素B。

相关申请

本申请要求2012年7月30日提交的美国临时申请号61/677,414和2013年6月17日提交的美国临时申请号61/835,825的优先权，每一个前面提及的申请通过引用而全文结合到本文中。

发明领域

本发明涉及未纯化的或低纯度(40-74重量%)基于大豆的磷脂酰丝氨酸(PS)制备脂质卷(cochleates)的能力、由基于大豆的PS制备药物-脂质卷的方法和该药物-负载的脂质卷作为药物治疗的用途。

发明背景

脂质卷递送媒介物为用于递送宽范围的生物活性治疗产品的基于广阔的技术。脂质卷递送媒介物为包含简单的天然存在的材料(例如，磷脂酰丝氨酸和钙)的稳定的磷脂-阳离子沉淀物。

脂质卷的双层结构提供保护免于缔合的或“卷成螺旋形的(encochleated)”分子的降解。由于整个脂质卷结构为一系列固体层，脂质卷结构内部中的组分保持基本上完整，即使脂质卷的外层可能暴露于苛刻的环境条件或酶。这包括保护免于在胃中消化。

利用这些独特的性质，脂质卷已用于调节和增强广谱的重要但是难以配制生物药物的口服生物利用度，包括水溶解度差的化合物、蛋白质和肽药物和大的亲水分子。例如已实现两性霉素B、DNA疫苗和基因疗法的大的DNA构造/质粒、肽制剂和抗生素(例如氯法齐明)的脂质卷-介导的口服递送。

脂质卷可在含有阳离子的缓冲液中储存，或者冻干为粉末，在室温下储存，以及在给予前用液体重新组成。冻干对脂质卷形态学或功能不具有不利地影响。脂质卷制剂已显示在含有阳离子的缓冲液中在4℃下稳定多于两年，在室温下作为冻干的粉末稳定至少一年。

脂质卷可通过若干方法制备，例如捕集或水凝胶方法(国际申请公布号WO 03/082209，其通过引用而全文结合到本文中)。

大豆PS在健康食物储存中作为营养补充剂而销售。未纯化的(40%) PS已作为营养补充剂使用和研究并且作为在老年人中对增强脑功能具有有益效果的组分(Villardita C等人，Clin. Trials J. 24，1987，84-93)。

虽然未纯化的大豆PS (NSPS)已销售并且对患者进行研究，但是NSPS (或低纯度PS)从未用于制备脂质卷和使用这些脂质卷来递送药物。如在WO 03/082209中先前公开的，NSPS不形成脂质卷，并且需要纯化过程来增强在PS的内含物中的NSPS，直至达到至少约75重量%的PS，这种百分数允许形成脂质卷。

发明概述

已经意外地发现，NSPS或低纯度基于大豆的PS (40-74重量%)仍可形成脂质卷。

简要地，根据本发明，改进的基于脂质的脂质卷通过使用未纯化的或低纯度大豆磷脂酰丝氨酸作为脂质来源而制备。改进的脂质卷含有其量为脂质的约40%-74% (优选45-70%，更优选45-55%)重量的大豆磷脂酰丝氨酸。改进的脂质卷可为空的或负载的脂质卷。负载的脂质卷可含有任何生物活性剂或生物活性剂的组合，例如，蛋白质、小的肽、多核苷酸、氨基糖苷类药物、抗病毒药物、麻醉剂、抗生素、抗真菌药物、抗癌药物、免疫抑制剂、甾体抗炎药、非甾体抗炎药、镇静剂、营养补充剂、草本植物产物、维生素或血管扩张药物。在实践本发明中特别关注的是，抗真菌药物或抗生素药物在本发明的基于大豆的磷脂酰丝氨酸脂质卷中负载，以提供具有降低的毒性的成本有效的和改进的抗真菌药物/抗生素药物。优选的抗真菌药物包括两性霉素-B和制霉菌素。优选的抗生素药物包括氨基糖苷类药物和阿米卡星。