[发明专利]低温下β‑葡萄糖苷酶活性增强的多肽

权利要求书

1.一种具有β-葡萄糖苷酶活性的多肽，其氨基酸序列是SEQ ID NO：1。

2.一种经纯化的或分离的核酸，其特征在于，它编码权利要求1所述的多肽。

3.根据权利要求2所述的核酸，其特征在于，它包含核酸序列SEQ ID NO：2。

4.一种载体，其特征在于，它包含权利要求2或3所述的核酸。

5.一种分离的宿主细胞，其特征在于，它包含权利要求1所述的多肽、或权利要求2或3所述的核酸、或权利要求4所述的载体。

6.根据权利要求5所述的分离的宿主细胞，其特征在于，它选自木霉属(Trichoderma)、曲霉属(Aspergillus)、脉孢 菌属(Neurospora)、腐质霉属(Humicola)、青霉属(Penicillium)、镰刀菌属(Fusarium)、高温单孢菌属(Thermomonospora)、毁丝霉属(Myceliophthora)、金孢子菌属(Chrysosporium)、芽孢杆菌属(Bacillus)、假单胞 菌属(Pesudomonas),埃希氏菌属(Escherichia)、梭状芽孢杆菌(Clostridium)、纤维单胞菌属(Cellulomonas)、链霉菌属(Streptomyces)、耶罗维亚酵母属(Yarrowia)、毕赤酵母属(Pichia)和酵母属(Saccharomyces)。

7.根据权利要求5或6所述的分离的宿主细胞，其特征在于，它选自里氏木霉(Trichoderma reesei)、Trichoderma viridae、康氏木霉(Trichoderma koningii)、黑曲霉(Aspergillus niger)、构巢曲霉(Aspergillus nidulans)、文氏曲霉(Aspergillus wentii)、米曲霉(Aspergillus oryzae)、海枣曲霉(Aspergillus phoenicis)、粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)、灰腐质霉(Humicola grisae)、嗜热毁丝霉(Myceliophthora thermopila)、Chrysosporium lucknowense、嗜松青霉(Penicillium pinophilum)、草酸青霉(Penicillium oxalicum)、大肠杆菌(Escherichia coli)、丙酮丁醇梭菌(Clostridium acetobutylicum)、糖解梭菌(Clostridium saccharolyticum)、拜氏梭菌(Clostridium benjerinckii)、丁酸梭菌(Clostridium butylicum)、毕赤酵母(Pichia pastoris)、解脂耶罗维亚酵母(Yarrowia lipolityca)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和它们的混合物。

8.根据权利要求6所述的分离的宿主细胞，其特征在于，它是里氏木霉。

9.根据权利要求6所述的分离的宿主细胞，其特征在于，它是酿酒酵母。

10.权利要求1所述的多肽或权利要求5-9任一项所述的细胞用于水解β-低聚糖的用途。

11.权利要求1所述的多肽或权利要求5-9任一项所述的细胞用于将纤维二糖水解为葡萄糖的用途。

12.权利要求1所述的多肽或权利要求5-9任一项所述的细胞用于生产生物燃料的用途。

13.作用于木质纤维素生物质的酶组合物，所述酶组合物由丝状真菌产生，且含有至少一种根据权利要求1所述的多肽。

14.一种从生物质生产生物燃料的方法，包括以下步骤：

-将待水解的材料悬浮于水相；

-在根据权利要求13所述的酶组合物或根据权利要求5-9任一项所述的细胞存在下水解木质纤维素生物质以产生含有葡萄糖的水解物；

-发酵水解物中的葡萄糖以产生发酵液；

-从发酵液中分离生物燃料，

所述水解和发酵步骤同时进行。