[发明专利]外膜囊泡

权利要求书

1.一种来自革兰氏阴性细菌的外膜囊泡(OMV)，其特征在于，所述OMV包含至少一种在其腔中游离的异源蛋白，并且当给予哺乳动物时，所述OMV能够引发针对所述异源蛋白的免疫应答，所述异源蛋白在所述OMV的腔中有功能活性，所述异源蛋白是可溶性蛋白，所述异源蛋白是(a)异源生物体中的周质蛋白且天然信号序列被周质蛋白的信号序列取代，或是(b)异源生物体中的膜相关蛋白质并且删除了膜锚定物，其中所述革兰氏阴性细菌是大肠杆菌，并且其中所述异源蛋白是来自酿脓链球菌的胞外胆固醇依赖性链球菌溶血素O的双突变体(Slo-dm)或者来自酿脓链球菌的细胞被膜丝氨酸蛋白酶SpyCep。

2.如权利要求1所述的OMV，其特征在于，所述免疫应答是抗体免疫应答。

3.一种制备权利要求1所述的OMV的方法，所述方法包括在所述革兰氏阴性细菌的周质中表达所述异源蛋白的步骤。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，使用表达载体使所述异源蛋白在革兰氏阴性细菌的周质中表达，所述表达载体包含与周质蛋白的信号序列的编码核酸可操作连接的所述异源蛋白的编码核酸序列。

5.如权利要求3或4所述的方法，其特征在于，所述方法还包括分离所述OMV的步骤。

6.通过权利要求3-5中任一项所述的方法得到的OMV。

7.如权利要求1、2和6中任一项所述的OMV，其特征在于，所述革兰氏阴性细菌是所述革兰氏阴性细菌的高发泡菌株。

8.如权利要求7所述的OMV，其特征在于，所述革兰氏阴性细菌是ΔtolR大肠杆菌菌株或ΔompA大肠杆菌菌株。

9.如权利要求1、2和6中任一项所述的OMV，其特征在于，所述异源蛋白是抗原。

10.如权利要求1、2和6中任一项所述的OMV，其特征在于，所述OMV包含至少两种在其腔中游离的异源蛋白。

11.如权利要求10所述的OMV，其特征在于，所述OMV包含至少三种在其腔中游离的异源蛋白。

12.如权利要求10所述的OMV，其特征在于，所述异源蛋白包含来自酿脓链球菌的胞外胆固醇依赖性链球菌溶血素O的双突变体(Slo-dm)和来自酿脓链球菌的假定表面排斥蛋白Spy0269。

13.如权利要求11所述的OMV，其特征在于，所述异源蛋白包括来自酿脓链球菌的胞外胆固醇依赖性链球菌溶血素O的双突变体(Slo-dm)、来自酿脓链球菌的细胞被膜丝氨酸蛋白酶SpyCEP和来自酿脓链球菌的假定表面排斥蛋白Spy0269。

14.一种药物组合物，所述药物组合物包含(a)如权利要求1、2或6-13中任一项所述的OMV和(b)药学上可接受的运载体。

15.如权利要求14所述的药物组合物，其特征在于，所述组合物是免疫原性组合物。

16.如权利要求14或15所述的药物组合物，其特征在于，所述组合物是疫苗。

17.来自革兰氏阴性细菌的OMV用于制备在哺乳动物中产生针对异源蛋白的免疫应答的产品的用途，其中所述OMV在其腔中包含至少一种异源蛋白，并且所述免疫应答针对所述OMV中的所述异源蛋白，其中所述革兰氏阴性细菌是大肠杆菌，并且其中所述异源蛋白是来自酿脓链球菌的胞外胆固醇依赖性链球菌溶血素O的双突变体(Slo-dm)或者来自酿脓链球菌的细胞被膜丝氨酸蛋白酶SpyCep。