[发明专利]个体的结核感染状态

说明书

在第一方面，本发明涉及一种诊断或确定个体结核感染状态的方法，所述的个体患有或疑似患有结核感染。在另一方面，还提供了一种对结核感染个体治疗方案分层次的方法，以及一种预测患有结核感染个体的临床结果或确定疗程的方法。此外，本发明提供了一种监测个体内的结核感染自潜伏至活性状态(或其相反过程)变化的方法。另外，本发明涉及一种用于诊断或检测结核感染状态的试剂盒，以及结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)丙氨酸脱氢酶在个体中特异性区分结核潜伏状态和活动性疾病状态的应用。

现有技术

在过去的十年里，结核分枝杆菌(TB)感染的体外免疫诊断取得了很大的进步(Machingaidze S.等.,Pediatr Infect Dis J.2011；30:694-700)。有三种市售可得的结核分枝杆菌特异性γ-干扰素(interferon-γ)释放试验(IGRAs)。离体接触特异性结核分枝杆菌抗原后，这些试验通过ELISpot(T-SPOT.TB-牛津免疫技术，阿宾顿，英国(Oxford Immunotec,Abingdon,UK))检测单核细胞(mononuclear cell)释放的γ-干扰素(INF-γ)释放或通过ELISA((QuantiFERON-TB GOLD and QuantiFERON-TB GOLD in tube；QFT-G-IT；塞蒂斯公司(Cellestis),卡内基，澳大利亚(Carnegie,Australia))检测全血中的γ-干扰素(INF-γ)释放。相对于结核菌素皮肤实验(TST)，IGRAs有几个优点：受先前接种的卡介苗(BCG)或非结核病的分支杆菌感染的影响最小，不产生加强效应(booster effect)，无需反复去医疗机构，且对结果的解读并不依赖于操作者(Chiappini等，Clin Ther.2012年4月16日)。据报道，成年人的IGRAs特异性更高，灵敏度至少与TST相同，现已收录为成年人诊断规程的指导守则(Mazurek GH等,美国,2010,MMWR Recomm Rep.2010；59:1-25.)。然而，在对儿童人群的研究中，所报道的IGRAs的灵敏度和特异性相差很大，鉴于数据不佳且相反，因此建议应注意其在儿童中的应用(Machingaidze S.等,Pediatr Infect Dis J.2011；30:694-700；Sun L.等，FEMS Immunol.Med.Microbiol.2011；63:165-73；Mandalakas AM,等,Int J Tuberc Lung Dis 2011；15:1018-32)。此外，它们并不能用于区分活动性和潜伏性结核感染(LTBI)((Amanatidou V.等,Eur J Clin Microbiol Infect Dis.2012年1月4日)。这个问题对于儿科医师来说十分重要，因为在儿童中，罕有通过培养物确认的明确TB诊断。儿童的TB通常含菌较少，而且，基于TST和IGRA结果、临床症状和体征、影像学发现、个人史、对TB治疗的反应，以及在本领域中医生的经验，大部分儿童的TB诊断都是“疑似性”疾病。

当具有活动性TB体征提示的儿童IGRA呈阳性时，并不能明确诊断，尤其是当这名儿童来自TB高发区域。IGRA的阳性结果可能是由于TB疾病造成，也可能是LTBI造成的，其可能是导致所调查的症状或体征的疾病的意外所致。在此情况下，一种能够精确区分活动性结核和潜伏性TB感染的试验就变得很有价值。目前，在基于除INF-γ以外的细胞因子(如：IL-10或Il-2)，采用ELISpot试验(Amanatidou V.等,Eur J Clin Microbiol Infect Dis.2012年1月4日)的研究或探索除ESAT-6、CFP-10和TB7.7(目前包含在市售的IGRAs中)以外的其他分支杆菌抗原的免疫反应的研究尚未成功。