[发明专利]核酸样品制备有效
申请号: | 201380031540.X | 申请日: | 2013-04-16 |
公开(公告)号: | CN104583420B | 公开(公告)日: | 2017-12-15 |
发明(设计)人: | 保罗·斯万森;罗伯特·特勒;仰凯;伊琳娜·多布罗沃斯凯亚;大卫·刘;拉加拉姆·克里斯南;大卫·夏洛特;尤金·图;詹姆士·麦肯纳;卢卡斯·库摩沙 | 申请(专利权)人: | 生物动力学公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/00 |
代理公司: | 北京安信方达知识产权代理有限公司11262 | 代理人: | 王思琪,郑霞 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 核酸 样品 制备 | ||
1.一种从流体中分离核酸的方法,该方法包括:
a.将流体施加到装置上,该装置包含能够建立AC动电场区的电极阵列;
b.使流体中的细胞或其它颗粒物质集中在第一AC动电场区内,其中所述流体的电导率为100mS/m或更大;
c.在第一AC动电场区内裂解所述细胞;
d.在第二AC动电场区内分离所述核酸,其中所述第二AC动电场区是第二介电电泳高场区;和
e.从所述第一AC动电场区中冲洗被集中的细胞和/或其它颗粒物质。
2.根据权利要求1所述的方法,其中所述流体包含核酸、聚集的蛋白质、细胞碎屑、病毒,或其组合。
3.根据权利要求1所述的方法,其中所述核酸包含高分子量核酸。
4.根据权利要求1所述的方法,其中所述核酸包含高分子量DNA、较小的DNA、RNA,或其组合。
5.根据权利要求1的方法,进一步包括洗脱在所述第二介电电泳高场区中分离的核酸用于进一步表征。
6.根据权利要求1的方法,其中所述样品为全血、血清、血浆、脑脊液、尿或唾液。
7.根据权利要求1的方法,其中所述样品为血液。
8.根据权利要求1的方法,其中所述AC动电场是使用具有1伏至40伏峰-峰值的电压和/或5Hz至5,000,000Hz的频率和5%至50%的占空比的交流电产生的。
9.根据权利要求1的方法,其中所述流体的电导率为500mS/m或更大。
10.根据权利要求1的方法,其中所述电极阵列旋涂有水凝胶,所述水凝胶具有0.1微米至1微米的厚度。
11.根据权利要求10的方法,其中所述水凝胶包含两层或更多层合成聚合物。
12.根据权利要求10的方法,其中所述水凝胶在旋涂之前具有0.5cP至5cP的粘度。
13.根据权利要求10的方法,其中所述水凝胶具有0.1S/m至1.0S/m的电导率。
14.根据权利要求1的方法,其中所述电极阵列包括波浪线配置,其中该配置包含重复单元,该重复单元包含由连接体连接的一对点的形状,其中所述连接体朝着所述一对点之间的中点处向内逐渐变细,其中所述点的直径为沿重复单元长度的最宽处,其中一组平行的重复单元之间的边缘到边缘距离是等距的或大致等距的。
15.根据权利要求1的方法,其中所述电极阵列包含相对介电常数为2.0至4.0的钝化层。
16.一种从流体中分离核酸的方法,该方法包括:
a.将流体施加到装置上,该装置包含能够建立AC动电场区的电极阵列;
b.使流体中的细胞或其它颗粒物质集中在第一AC动电场区内,其中所述流体的电导率为100mS/m或更大;
c.在第一AC动电场区内裂解所述细胞;
d.在第二AC动电场区内分离所述核酸,其中所述第二AC动电场区是第二介电电泳高场区;
e.从所述第一AC动电场区中冲洗被集中的细胞和/或其它颗粒物质;和
f.洗脱所述第二介电电泳高场区中的结合的核酸。
17.根据权利要求16所述的方法,其中所述流体包含核酸、聚集的蛋白质、细胞碎屑、病毒,或其组合。
18.根据权利要求16所述的方法,其中所述核酸包含高分子量核酸。
19.根据权利要求16所述的方法,其中所述核酸包含高分子量高分子量DNA、较小的DNA、RNA,或其组合。
20.根据权利要求16所述的方法,其中所述样品为全血、血清、血浆、脑脊液、尿或唾液。
21.根据权利要求20的方法,其中所述样品为血液。
22.根据权利要求16的方法,其中所述AC动电场是使用具有1伏至40伏峰-峰值的电压和/或5Hz至5,000,000Hz的频率和5%至50%的占空比的交流电产生的。
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