[发明专利]含磷脂组合物的制造方法及含磷脂组合物

说明书

技术领域

本发明涉及包含磷脂酰丝氨酸的含磷脂组合物的制造方法及含磷脂组合物。

背景技术

磷脂酰丝氨酸被认为对认知功能障碍、记忆力、集中力的改善等脑功能的提高是有效的，已知通过键合DHA(二十二碳六烯酸)其效果进一步提高。DHA键合磷脂酰丝氨酸可以通过从牛脑中萃取来生产，但出于疯牛病的影响近年来没有进行。另外，已知DHA键合磷脂酰丝氨酸可以通过在丝氨酸的存在下使磷脂酶D作用于DHA键合磷脂酰胆碱、DHA键合磷脂酰乙醇胺等来合成(专利文献1)。另外，关于作为DHA键合磷脂酰丝氨酸的原料的DHA键合磷脂酰胆碱，有从包含大量多元不饱和脂肪酸的、金枪鱼、鲣鱼、鲐鱼、沙丁鱼、秋刀鱼、竹荚鱼等鱼类的组织；由用包含多元不饱和脂肪酸的饲料饲养的鸡得到的鸡蛋中萃取的方法(专利文献1)。另外，还已知将来自大豆的磷脂酰丝氨酸与海洋性的DHA键合磷脂酰丝氨酸(丝氨酸甘油磷脂接合体)混合来使用的方法(专利文献2)。但是，这些方法中原料高价，且供给不稳定。

另一方面，作为使DHA键合于磷脂来制作DHA键合磷脂的方法，有使用磷脂酶A2将磷脂的2位的脂肪酸水解而得的溶血磷脂、或在市售的溶血磷脂中导入DHA的方法(专利文献3)。

但是，在专利文献3中记载的方法中，未进行将磷脂的2位的脂肪酸水解时所使用的磷脂酶A2的除去和失活操作，因此磷脂酶A2等量残留，因而有时键合于溶血磷脂的DHA在保存中经时性脱离。另外，若想要将该DHA键合磷脂按照专利文献1记载的方法进行丝氨酸化，则基于丝氨酸和磷脂酶D的丝氨酸化需要水，因而存在反应中在2位发生水解的问题，未能高效地进行DHA键合磷脂酰丝氨酸的合成。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开平9－121879号公报

专利文献2：日本特表2011－525525公报

专利文献3：日本特开2010－068799号公报

发明内容

发明要解决的课题

使用安全的原料低价且稳定地供给大量键合有高度不饱和脂肪酸的磷脂酰丝氨酸、尤其是DHA键合磷脂酰丝氨酸的方法尚未知。

因此，本发明的目的在于，提供能够低价且稳定地供给包含2位键合有大量高度不饱和脂肪酸的磷脂酰丝氨酸的含磷脂组合物的制造方法、以及包含大量键合有高度不饱和脂肪酸的磷脂酰丝氨酸的含磷脂组合物。

用于解决课题的手段

本发明人为了解决上述课题而反复认真研究的结果发现，若以磷脂和高度不饱和脂肪酸为原料，并实施包括特定的工序的制造方法，则能够得到以高效率导入了高度不饱和脂肪酸的含磷脂组合物，并完成了本发明。

即，本发明的第一发明涉及一种含磷脂组合物的制造方法，其是含磷脂组合物整体中含有10重量％以上的磷脂酰丝氨酸、且构成脂肪酸整体中高度不饱和脂肪酸的含量为10～40重量％的含磷脂组合物的制造方法，并包括以下的工序(1)、(2)及工序(3)、(4)。

工序(1)：通过磷脂酶A2(PLA2)，进行溶血磷脂与高度不饱和脂肪酸的酯化反应，得到磷脂。

工序(2)：在工序(1)之后，使磷脂中的PLA2活性为10U/g(磷脂)以下。

工序(3)：在磷脂酶D(PLD)的存在下，进行磷脂与丝氨酸的混合物中的碱交换反应，形成包含磷脂酰丝氨酸的含磷脂组合物。

工序(4)：将包含磷脂酰丝氨酸的含磷脂组合物分离。

作为本发明的实施方式，可以采用在上述工序(2)中从磷脂除去PLA2的方式、和在上述工序(2)中使磷脂中的PLA2失活的方式中的至少一种。

本发明的一实施方式中，在工序(2)中，在工序(1)之后，向磷脂中添加无机盐的甘油溶液、碳数4以下的醇、以及不与甘油混溶且溶解磷脂的有机溶剂，搅拌后静置，形成包含磷脂的有机溶剂层、和包含PLA2的甘油溶液层，将该有机溶剂层从该甘油溶液层分离，由此从磷脂中除去PLA2。

在此，优选无机盐的甘油溶液中的水分量为10重量％以下。

优选不与甘油混溶且溶解磷脂的有机溶剂是碳数为5～8的烃溶剂和/或醚。

优选甘油溶液中的无机盐浓度为0.2～40重量％。

优选无机盐为选自由硫酸锌、氯化钾、氯化镁、硫酸镁、氯化钠及氯化钙构成的组的至少1种。

优选有机溶剂为己烷。

优选碳数4以下的醇为乙醇。